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3、  免疫血液學(xué)檢測技術(shù)方法學(xué)進(jìn)展

隨著醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的不斷發(fā)展，越來越多的檢測技術(shù)納入到免疫血液學(xué)檢測當(dāng)中來，包括經(jīng)典的血清免疫學(xué)檢測技術(shù)和分子生物學(xué)檢測技術(shù)等。從檢測目的上來講，目前最常用的有以下幾個(gè)試驗(yàn)：ABO定型、Rh定型、交叉配血試驗(yàn)、傳統(tǒng)交叉配血試驗(yàn)、計(jì)算機(jī)配血、抗體測定與抗體鑒定、吸收放散試驗(yàn)、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)。

在臨床實(shí)驗(yàn)室當(dāng)中，血清免疫學(xué)方法通常包括常規(guī)試驗(yàn)和輔助實(shí)驗(yàn)兩大類。常規(guī)試驗(yàn)常用的有血型鑒定試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩查及鑒定試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)等；輔助試驗(yàn)通常包括吸收放散試驗(yàn)、唾液型物質(zhì)抑制試驗(yàn)以及抗體效價(jià)測定等。通過血型血清學(xué)試驗(yàn)組合，篩查出有臨床意義的不規(guī)則抗體，忽略沒有臨床意義抗體的干擾，確保輸血安全。

生理鹽水介質(zhì)凝集法：鹽水介質(zhì)凝集試驗(yàn)中的抗原是鹽水紅細(xì)胞懸液,紅細(xì)胞上的抗原決定簇與相應(yīng)的抗體分子的抗原結(jié)合部位結(jié)合,交叉連接形成肉眼可見的凝集塊。鹽水介質(zhì)凝集試驗(yàn)用于IgM抗體的檢出、鑒定和鹽水交叉配血試驗(yàn)以及通過鹽水抗體鑒定的血型系統(tǒng),如ABO、MN、P、S等�？笰抗B特異性IgG類抗體有時(shí)可直接凝集懸浮于鹽水中的紅細(xì)胞，與紅細(xì)胞表面抗原位點(diǎn)數(shù)目和抗原決定簇位置有關(guān)。

抗人球蛋白及改良方法：概述：抗人球蛋白試驗(yàn)是1945年由Coombs等人建立的，又稱Coombs試驗(yàn)�？谷饲虻鞍自囼�(yàn)的建立在血型血清學(xué)上著非常重要的意義。是診斷免疫性溶血性貧血的主要方法之一。Coombs試驗(yàn)方法發(fā)明后近半個(gè)世紀(jì)時(shí)間里，一直是血型血清學(xué)、血液免疫學(xué)研究中最為重要的技術(shù)方法之一，相容性檢測技術(shù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

酶介質(zhì)凝集法：1947 年Morton 和Pickles最先報(bào)道使用蛋白水解酶增強(qiáng)紅細(xì)胞凝集反應(yīng)的方法。20世紀(jì)90年代，該技術(shù)陸續(xù)被聚凝胺技術(shù)、微柱凝集抗人球蛋白技術(shù)所取代可分為一步酶法和二步酶法。

聚凝胺法：1980年Lalezari 和Jiang首先將聚凝胺試驗(yàn)(Manual Polybrene Test，MPT)應(yīng)用于血庫作業(yè)上。20世紀(jì)90年代中后期，聚凝胺試驗(yàn)方法進(jìn)入國內(nèi)免疫血液學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室。

固相捕獲技術(shù)：固相捕獲技術(shù)是基于微孔板的血型免疫學(xué)技術(shù)，能夠進(jìn)行抗體篩查和鑒定分析，同時(shí)提供簡單易用的標(biāo)準(zhǔn)化檢測方法，提高了對有臨床意義的抗體檢測的靈敏度。固相免捕獲技術(shù)在免疫學(xué)和化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中已應(yīng)用了許多年。F.V. Plapp博士及其同事報(bào)告，1984年他們采用固相紅細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)（Solid Phase Red Cell Adherence Assay，SPRCA）檢測了紅細(xì)胞抗原和抗體。最早商業(yè)開發(fā)的固相紅細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)技術(shù)和設(shè)備是由Immucor公司生產(chǎn)的，所用商標(biāo)名是Capture，用于檢測紅細(xì)胞和血小板抗體。Capture基于微孔板的固相技術(shù)也適合于自動化。1998年，Immucor推出了首臺經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)的全自動血型鑒定和抗體篩查分析儀—ABS2000?，并在2002年至2010年間相繼推出了Galileo?、Echo?和NEO?血庫系統(tǒng)平臺。Echo于2007年在全球范圍內(nèi)推出，NEO于2010年在全球范圍內(nèi)推出。

紅細(xì)胞磁化技術(shù)：紅細(xì)胞磁化技術(shù)（Erythrocyte-magnetized technology，EMT）是一種基于紅細(xì)胞磁化的血型免疫學(xué)技術(shù)。磁珠的應(yīng)用使得抗原和抗體可以在磁力的作用下快速的移動。EMT技術(shù)使用磁力替代離心力，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)過程中的離心步驟，有效提高了實(shí)驗(yàn)的可靠性，避免了冷凝集、纖維蛋白等導(dǎo)致的假陽性現(xiàn)象。最早商業(yè)開發(fā)紅細(xì)胞磁化技術(shù)的是法國迪卡斯公司（Diagast），該技術(shù)也用于在Qwalys 3和Qwalys XL自動化檢測平臺。

免疫磁珠技術(shù) ：免疫磁珠技術(shù)采用現(xiàn)代納米磁珠技術(shù)與免疫學(xué)相結(jié)合,將紅細(xì)胞膜包被于免疫磁珠表面,應(yīng)用于臨床常規(guī)檢測。柱凝集技術(shù)是應(yīng)用于臨床輸血中的一種新的檢測方法，在二十一世紀(jì)逐漸的應(yīng)用于輸血領(lǐng)域，對輸血行業(yè)的發(fā)展起到巨大的推動作用。

柱凝集技術(shù)是應(yīng)用于臨床輸血中的一種新的檢測方法，在二十一世紀(jì)逐漸的應(yīng)用于輸血領(lǐng)域，對輸血行業(yè)的發(fā)展起到巨大的推動作用。柱凝集技術(shù)可以對標(biāo)本進(jìn)行血型鑒定，抗體篩查，交叉配血試驗(yàn)等相關(guān)檢查。反應(yīng)柱中使用了一定大小的凝膠或玻璃珠作為分離介質(zhì)，起到分子篩的作用，能將凝集和非凝集細(xì)胞分開。傳統(tǒng)的抗人球蛋白試管法是經(jīng)典的免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)。但是由于操作時(shí)間長，需要洗滌紅細(xì)胞，結(jié)果人為影響因素多，從而阻礙的其在臨床輸血中的應(yīng)用。柱凝集技術(shù)作為一種血型不規(guī)則抗體篩查，血型鑒定，交叉配血的新方法，具有快速，簡便，靈敏，結(jié)果穩(wěn)定，操作標(biāo)準(zhǔn)化，無需紅細(xì)胞洗滌，從而縮短了試驗(yàn)時(shí)間，使輸血前檢測從手工方法進(jìn)入到全自動方法，在輸血科中得到了廣泛的應(yīng)用。

截至目前，柱凝集技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測，并且引起國內(nèi)越來越多的關(guān)注，經(jīng)過不斷地與其它方法對比分析，不論從血型鑒定，不規(guī)則抗體篩查，還是交叉配血驗(yàn)來看，其結(jié)果充分表明明顯優(yōu)越于傳統(tǒng)抗球蛋白法、木瓜酶法以及凝聚胺法。由于柱凝集技術(shù)的方法的靈敏度高，特異性好，結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡便快速，為其它方法所不能比擬。但是在國內(nèi)由于進(jìn)口試劑價(jià)格等方面的原因，阻礙了其全面推廣的速度，因此現(xiàn)在很多國內(nèi)廠商的國產(chǎn)試劑卡已經(jīng)陸續(xù)上市，但其結(jié)果的穩(wěn)定性，準(zhǔn)確性上還有待進(jìn)一步評估。

第四節(jié)  血源安全檢測政策、法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)

1、血站技術(shù)操作規(guī)范

①    國家衛(wèi)生計(jì)生委關(guān)于印發(fā)血站技術(shù)操作規(guī)程（2015版）的通知

②    血站技術(shù)操作規(guī)程（2015版）

2、單采血漿站管理辦法

①    單采血漿站管理辦法

②    國家衛(wèi)生計(jì)生委關(guān)于修訂《單采血漿站管理辦法》的決定

3、血站管理辦法

①    血站管理辦法

②    國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會關(guān)于印發(fā)全面推進(jìn)血站核酸檢測工作實(shí)施方案（2013—2015年）的通知

4、免疫血液學(xué)市場相關(guān)法律法規(guī)簡介

  免疫血液學(xué)檢測不同于其他的檢驗(yàn)學(xué)科，它直接關(guān)系到血液輸注后患者的生命安全。所以要保證血液質(zhì)量和輸血安全，除需要先進(jìn)的檢測技術(shù)和合理的檢測程序外，還需要有法律法規(guī)依據(jù)、嚴(yán)密的組織管理，來保證這些技術(shù)和程序的有效實(shí)施。

臨床輸血的組織管理由衛(wèi)計(jì)委領(lǐng)導(dǎo)下的各級衛(wèi)生行政部門組成，負(fù)責(zé)制定政策和監(jiān)督檢查；執(zhí)行機(jī)構(gòu)為各級醫(yī)院的臨床用血管理委員會，負(fù)責(zé)臨床用血的規(guī)范管理和技術(shù)指導(dǎo)，開展臨床合理用血、科學(xué)用血的教育和培訓(xùn)；各級檢驗(yàn)部門負(fù)責(zé)輸血相容性時(shí)間質(zhì)評。臨床輸血相關(guān)法律法規(guī)主要是針對臨床用血申請、供給、臨床輸血規(guī)范的管理和監(jiān)督的法規(guī)，目的是實(shí)現(xiàn)血液輸注全過程進(jìn)行規(guī)定、指導(dǎo)、控制和改進(jìn)工作。臨床輸血相關(guān)的主要法律法規(guī)如表1所示。2016年7月29日，經(jīng)國家標(biāo)委會批準(zhǔn)，“輸血醫(yī)學(xué)”正式被增設(shè)為二級學(xué)科。我們相信，更加注重臨床輸血專業(yè)教育和專業(yè)人才培養(yǎng)的輸血醫(yī)學(xué)，未來必定大有可為。

表1. 臨床輸血相關(guān)法律法規(guī)

第五節(jié) 2016年大事件

我國血液制品因原料短缺和技術(shù)受限以及政策壁壘等問題而長期備受市場關(guān)注，產(chǎn)品供應(yīng)常出現(xiàn)一藥難求的現(xiàn)象。為了探討和促進(jìn)血液制品長期穩(wěn)定健康的發(fā)展，在湖南省衛(wèi)生計(jì)生委醫(yī)療管理服務(wù)指導(dǎo)中心、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所的大力支持下，中國獻(xiàn)血網(wǎng)、湖南智一堂血漿原料管理有限公司決定舉辦“‘十三·五’后，誰來保障中國血液制品供給”高峰論壇。