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引言

    機體含有大量的水分，這些水和溶解在水里的各種物質(zhì)總稱為體液，體液可分為兩大部分：細胞內(nèi)液和細胞外液，存在于細胞內(nèi)的稱為細胞內(nèi)液，約占體重的40%。存在于細胞外的稱為細胞外液。細胞內(nèi)液主要指細胞內(nèi)的小分子的水、無機離子，中等分子的脂類、氨基酸、核苷酸，大分子的蛋白質(zhì)、核酸、脂蛋白、多糖。細胞外液又可分為血液、尿液、組織間隙液（簡稱組織液或細胞間液）、淋巴液、腦脊液、胃腸道分泌液、精液、肺腔的液體、腹膜的液體等。因細胞內(nèi)液難以采集，臨床上主要通過對細胞外液的檢測，為疾病診斷、治療和預后提供科學依據(jù)。本章節(jié)主要就臨床上應(yīng)用最為廣泛的血液診斷和尿液診斷的相關(guān)進展情況進行闡述。

一、血液與體液診斷領(lǐng)域技術(shù)和產(chǎn)品的國內(nèi)外發(fā)展情況

（一）、血液分析流水線的逐步推廣

近年來，隨著檢驗醫(yī)學的飛速發(fā)展，新技術(shù)和新方法的層出不窮，傳統(tǒng)的檢驗項目也因為檢驗技術(shù)的進步而使得檢測結(jié)果日益得到臨床的信賴和認可。建設(shè)自動化實驗室，吸引了越來越多的大中型醫(yī)院的關(guān)注。由此推動了臨床檢驗樣本的大量增加，實驗室每天要處理的樣本量越來越多，尤其是一些三級醫(yī)院，每天的樣本數(shù)量都在萬位數(shù)的級別，有的甚至達到數(shù)萬，在這種情況下，單純的依賴增加操作人員和檢測儀器，擴大實驗室規(guī)模等初級方式來應(yīng)付大標本，不能從根本上解決問題，反而會產(chǎn)生新的問題，尤其是樣本差錯率、樣本周轉(zhuǎn)時間（test turn around time，TAT）、樣本前處理的質(zhì)量保證、檢測結(jié)果的審核和復檢等。

自2001年浙江大學第一醫(yī)院引進國內(nèi)第一條流水線至今，全國已安裝300多條自動化流水線和前處理系統(tǒng)，說明全國體外診斷市場已經(jīng)有了成熟和穩(wěn)定的流水線客戶和使用經(jīng)驗。各個企業(yè)已擁有成熟的流水線銷售、支持和服務(wù)團隊，并積累了豐富的經(jīng)驗。目前市場上常見的血液流水線品牌主要有：希森美康（Sysmex）、貝克曼庫爾特(Beckman Coulter)、羅氏(Roche)、西門子（Siemens）、邁瑞（Mindray）等。

1、Sysmex XN系列血液分析流水線

Sysmex XN以先進的設(shè)計理念 為滿足不同層次用戶的使用需求，可根據(jù)用戶要求靈活組合，真正實現(xiàn)了“X種客戶需求，N種解決方案”，如圖4-1。實現(xiàn)一鍵開機，簡化了開機程序，解決了繁瑣的開機步驟，消除了由開機不正確引發(fā)的各種故障。軟件系統(tǒng)配備 XN系列使用了新的軟件系統(tǒng)，操作界面更加簡便，突出了人性化。增加新的檢驗模式和通道，滿足不同標本的檢測需求，不同檢驗模式和通道進行參數(shù)比對，使得結(jié)果更加準確。多種復檢規(guī)則的聯(lián)合使用，滿足了不同標本的復檢要求，預設(shè)了多種復檢方案，大大降低了漏檢率。關(guān)機與日常保養(yǎng)同時進行 省去了操作者較為繁瑣的日常保養(yǎng)操作。 

XN-2000血液-體液一體機分析儀為是多功能、多參數(shù)、全自動血細胞分析儀器（如圖4-2），該儀器應(yīng)用流式細胞技術(shù)和電阻抗技術(shù)的雙重原理進行血細胞計數(shù)，并可進行原始細胞、有核紅細胞、幼稚細胞及血小板聚集、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、臨床開展的胸、腹腔積液常規(guī)分析中，有核細胞計數(shù)及分類是不可或缺的部分，對于判斷滲出液與漏出液以及多種疾病的診斷、治療和預后都有著重要的意義。傳統(tǒng)的有核細胞計數(shù)及分類為顯微鏡法，此法雖為金標準，但操作繁瑣且易受到人為主觀因素影響,如能自動化檢測，就可以在一定程度上解決上述問題。XN-2000血液-體液一體機分析儀不僅可以對血液標本進行檢測,還提供了專門的模塊來對體液中的有核細胞進行檢測，現(xiàn)對其檢測結(jié)果進行分析及評價等多種異常情況的報警和提示，具有檢測速度快、樣本少等優(yōu)點。

2、貝克曼庫爾特DxH系列血液分析流水線

DxH800血細胞分析儀采用最新的模塊化設(shè)計理念，專為實驗室的需求度量身做成不同的血細胞分析儀流水線組合。DxH800血細胞分析儀無需任何連接軌道即可靈活地與多臺DxH800血細胞分析儀或DxH全自動推染片系統(tǒng)（DxH SMS）連接，組成血細胞分析流水線，如圖4-3。同時，為提高流水線的檢測效率，不同模塊之間可智能地分配樣本工作量。采用專利的磁力傳輸系統(tǒng)運送樣本，有效地提高了樣本的運轉(zhuǎn)效率。通過一定的規(guī)則設(shè)定，無需人為干預對結(jié)果異常樣本自動增加測試項目和重測功能。DxH800血細胞分析儀為立柜式結(jié)構(gòu)，檢測所配套的試劑可以擺放在位于儀器下方的試劑柜中，并具備實時的試劑追蹤功能，方便實驗室對試劑的管理。DxH800血細胞分析儀基于VCSn原理對“近于原始形態(tài)”的白細胞進行測量，所獲得的反映細胞形態(tài)學變化的測量參數(shù)——白細胞群落參數(shù)（cell population data,CPD）增至56項，從而可以更精細地反映疾病狀態(tài)下白細胞形態(tài)的變化。

圖4-3 DxH系列血液分析流水線

DxH800血細胞分析儀支持體液細胞檢測功能，并配有專用的體液質(zhì)控品。可以對多種體液標本，包括腦脊液、漿膜腔積液、穿刺液、脊髓等進行細胞顆粒的檢測，出報告體液紅細胞計數(shù)（RBC-BF）、體液有核細胞計數(shù)（TNC-BF）參數(shù)外，還提供體液中多個核細胞百分比（%）和絕對值（#）、單個核細胞的百分比（BFM%）和絕對值（BFM#）及幼稚細胞的報警等。

3、邁瑞CAL 8000血液分析流水線

CAL 8000全自動樣本處理系統(tǒng)與全自動血細胞分析儀、全自動推片染色機連接成流水線，實現(xiàn)血液樣本的自動調(diào)度與分配、運輸、回收、異常樣本自動智能復檢。該流水線可選擇全自動血細胞分析儀、全自動推片機數(shù)量組合成不同測試速度層次的血細胞分析流水線，如選擇4臺BC-6800/BC-6900和2臺SC-120組成CAL 8000 420流水線，樣本處理速度可達500個樣本/小時，如圖4-4。該流水線具有待分析樣本的試管架緩存功能、已分析完樣本的試管架緩存功能、一鍵開機功能、觸摸屏多自由度運動操作功能，用戶戴手套也能方便靈敏地操作。該流水線能提供定制的質(zhì)控專用試管架、推片專用試管架、網(wǎng)織紅細胞專用試管架。試管架兩側(cè)和上端都有醒目標識，方便用戶識別，快速查找樣本。急診樣本可在裝載平臺快速插入，保證急診樣本得以優(yōu)先、及時測試。提供機外試劑存儲設(shè)備，可讓用戶在不停止樣本檢測的情況下，方便更換試劑。

圖4-4 CAL-8000血液分析流水線

（二）、流式細胞術(shù)在二級以上醫(yī)療機構(gòu)的推廣

流式細胞術(shù)（flow cytometry,FCM）是利用流式細胞儀（flow cytometer）對血液、體液、骨髓、活檢材料、石蠟包埋組織中的有形成分、動植物的單細胞懸液，包括細胞、血小板、精子、微生物、細胞器，以及人工合成微球等的多重生物和物理、生化特性進行計數(shù)和定量分析，并能對特定細胞群體加以分選的細胞參量分析技術(shù)。而流式細胞儀是集激光、單克隆抗體、紫外光等多光源、熒光染料、標記技術(shù)、計算機及分選儀器。同傳統(tǒng)的熒光顯微鏡相比，流式細胞儀具有速度快、精度高、準確性好等特點，成為當代最先進的細胞定量分析技術(shù)。

自20世紀70年代以來，隨著流式細胞技術(shù)水平的不斷提高，其應(yīng)用于范圍也日益廣泛。目前，運用流式細胞儀幾乎可對各種組織來源的細胞及細胞亞群進行檢測，包括各種細胞的細胞膜、細胞質(zhì)及細胞核中各種蛋白分子的相對和絕對定量分析，細胞中染色體、DNA、RNA的定量等，可完成從細胞的某一種到多種生物學特征及功能的同時分析。臨床流式細胞術(shù)雖然是一門新興的檢驗技術(shù)，但是發(fā)展迅猛。流式細胞分析已逐漸成為推動臨床醫(yī)學發(fā)展的重要手段。目前國內(nèi)二級以上醫(yī)療機構(gòu)的臨床實驗室絕大多數(shù)已開展了流式細胞分析工作，并成為反映醫(yī)院較高臨床醫(yī)療與研究水平的標志。

目前國內(nèi)外醫(yī)學實驗室使用的分析型流式細胞儀主要有：NaviosTM型、CytomicsTM FC500 MCL/MPL型（如圖4-5）、FACSCaliburTM型（如圖4-6型）、FACS CantoTMⅡ型、BriCyte E6、NovoCyte型，分選型流式細胞儀主要有：MoFlo XDP型、MoFlo AstriosEQ型和FACSAriaTMⅡ型。

圖4-5 CytomicsTM FC500 MCL/MPL型流式細胞儀

圖4-6 FACSCaliburTM型流式細胞儀

如今流式細胞術(shù)已經(jīng)日益成熟，隨著光電技術(shù)、計算機技術(shù)進一步發(fā)展，流式細胞儀已開始向模塊化、經(jīng)濟型發(fā)展，即它的光學系統(tǒng)、檢測器單位和電子系統(tǒng)更加集成化，并可按照實驗要求進行靈活的調(diào)整和更換。此外，臨床型的流式細胞儀還追求更加自動化的操作，包括自動化的樣本處理及與LIS的雙向通訊等�，F(xiàn)在流式細胞術(shù)已成為腫瘤學、免疫學、血液學、細胞生物學、細胞遺傳學、生物化學等臨床醫(yī)學和基礎(chǔ)醫(yī)學等領(lǐng)域中的重要工具。

（三）、網(wǎng)織紅細胞檢測逐步被重視

網(wǎng)織紅細胞（Reticulocyte，RET）是尚未完全成熟的紅細胞（如圖4-7），在周圍血液中的數(shù)值可反映骨髓紅細胞的生成功能，因而對血液病的診斷和治療反應(yīng)的觀察均有其重要意義。

圖4-7 染色后的網(wǎng)織紅細胞（圖中含深藍色點狀細胞）

網(wǎng)織紅細胞增高，(1)提示骨髓造血功能旺盛見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血,尤以溶血性貧血時增加最為顯著，網(wǎng)織紅細胞百分比常在10%以上。(2)缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后,可見網(wǎng)織紅細胞明顯增加。

網(wǎng)織紅細胞減低，提示骨髓造血功能低下，見于再生障礙性貧血、急性白血病。網(wǎng)織紅細胞計數(shù)在診斷正常細胞貧血，或僅蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)果可以的小細胞時尤為重要；大細胞貧血伴網(wǎng)織紅細胞增多，常提示用葉酸或維生素B12治療有效。

目前僅在二甲及二甲級別的以上醫(yī)院開展網(wǎng)織紅細胞檢測項目，而基層醫(yī)療機構(gòu)迫于設(shè)備和技術(shù)人員的短缺，難以開展此項檢查，然而醫(yī)院分級診療已然成為趨勢，基層醫(yī)療機構(gòu)需要“獨擋一面”，對能夠檢測網(wǎng)織紅細胞的血細胞分析儀的需求日趨增強。優(yōu)利特URIT系列五分類血細胞分析儀，運用多角度偏振光散射白細胞分類（mult-angle polatised scatter separation of white cell,MAPSS）技術(shù)，無需對細胞染色，采用純物理的方法對白細胞進行精確的五分類，為國內(nèi)首家采用此分類方法的機型。URIT五分類血細胞分析儀全系機型均具有網(wǎng)織紅細胞檢測功能（如圖4-8），僅需一種網(wǎng)織紅染液，就能檢測提供3項網(wǎng)織紅細胞檢測參數(shù)，如圖4-9。其他進口或國產(chǎn)五分類血細胞分析儀，僅在其高端機型才能具有網(wǎng)織紅細胞的檢測功能。 

圖4-8 URIT系列五分類血細胞分析儀

圖4-9 URIT系列五分類血細胞分析儀RET檢測參數(shù)

（四）、血液常規(guī)分析(五分類)和CRP聯(lián)合檢測

人類C反映蛋白（C-reaction protein，CRP）是指在集體受到感染或組織損傷是血漿中的一些急劇上升的蛋白質(zhì)（急性蛋白）。CRP可以激活補體和加強吞噬細胞的吞噬而起調(diào)理作用，從而清除入侵機體的病原微生物和損傷、壞死、凋亡的組織細胞，在機體的天然免疫過程中發(fā)揮重要的保護作用。關(guān)于CRP的研究已有70多年的歷史，傳統(tǒng)觀點認為CRP是一種非特異的炎癥標志物，但近十年的研究揭示了CRP與炎癥、動脈粥樣硬化等心血管疾病的發(fā)生相關(guān)，并且是心血管疾病最強有力的預示因子和危險因子。

隨著預防性治療和防止濫用藥物的需求逐漸增加，臨床上對于臨床實驗室的快速和準確診斷提出更高的要求。血液常規(guī)分析(五分類)和CRP聯(lián)合檢測是對細菌和病毒感染鑒別診斷的高性價比指標，連續(xù)監(jiān)測對于術(shù)后感染其他炎癥和惡性疾病的診斷和療效監(jiān)測具有重要意義。在腦膜炎、肺炎等感染性疾病的急診治療中，快速的白細胞五分類和CRP聯(lián)合檢測，可有效提升急救的成功率。細菌性和病毒性感染的治療方案差別很大，因此，二者的鑒別診斷有重大意義。比如，細菌性感染時，中性粒細胞增加，CRP上升明顯，而病毒性感染，淋巴細胞數(shù)值增加，但CRP未有明顯變化。在心血管疾病預防方面，CRP在心血管事件發(fā)生的預示和治療預后判斷等方面有重要價值。CRP<1.Omg／L為低危險性；CRP1.0-3.Omg／L為中度危險性；CRP>3．Omg／L為高度危險性。

除了前述血液分析流水線具有血液常規(guī)分析(五分類)和CRP聯(lián)合檢測的功能，目前市面上具有能進行CRP檢測的單臺五分類血細胞分析儀有ABX Pentra MS CRP型（如圖4-10）、邁瑞B(yǎng)C-5390CRP型、帝邁D7/D5 CRP型等。CRP的檢測方法基本采用乳膠免疫比濁法，并通過標本對應(yīng)的HCT值對CRP結(jié)果進行自動修正。

圖4-10 ABX Pentra MS CRP型五分類血細胞分析儀