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《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》及《新型冠狀病毒肺炎重型、危重型病例診療方案（試行第二版）》建議根據(jù)病情需要監(jiān)測：血常規(guī)、尿常規(guī)、生化指標（肝腎功能、乳酸、血糖、電解質(zhì)、乳酸脫氫酶等）、心肌損傷標志物、C反應(yīng)蛋白、降鈣素原、凝血功能、動脈血氣分析、胸部影像學(xué)等，有條件者可行細胞因子檢測。
以上17個檢測項目，是否都了解了呢？現(xiàn)在我們就來學(xué)習(xí)下新冠肺炎診療中出現(xiàn)的這些檢查項目。
一、常規(guī)初診檢查指標
1.血常規(guī)
血常規(guī)是指通過觀察血細胞的數(shù)量變化及形態(tài)分布從而判斷血液狀況及疾病的檢查。血常規(guī)檢查包括有紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、白細胞(WBC)、白細胞分類計數(shù)及血小板(PLT)等。
診療方案中的描述：發(fā)病早期外周血白細胞總數(shù)正�；驕p少，淋巴細胞計數(shù)減少；嚴重者外周血淋巴細胞計數(shù)進行性減少；
常用儀器：全自動血細胞分析儀
全自動化程度：高，樣本直接上機檢測，批量進樣
樣本及用量：靜脈全血，5歲以下兒童可用手指末梢血；一般需10-30微升
檢測時間：單樣本1分鐘內(nèi)，門診30分鐘內(nèi)可拿到報告單
實驗室開展要求：基礎(chǔ)檢測項目，醫(yī)學(xué)檢驗實驗室必備
開展難度：★☆☆☆☆（非常容易）
血常規(guī)中的許多項具體指標都是一些常用的敏感指標，對機體內(nèi)許多病理改變都有敏感反映，其中白細胞分類計數(shù)中的淋巴細胞：減少多見于傳染病的急性期、放射病、細胞免疫缺陷病、長期應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后或接觸放射線等；增多見于傳染性淋巴細胞增多癥、結(jié)核病、瘧疾、慢性淋巴細胞白血病、百日咳、某些病毒感染等。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：入院時，82.1%的患者淋巴細胞減少，36.2%的患者血小板減少。總的來說，33.7%的患者出現(xiàn)白細胞減少�！吨袊錆h地區(qū) 2019 新型冠狀病毒肺炎 138 例住院患者臨床特征分析》中[4]分析33 例 NCP 患者（5 例非存活者和 28 例存活者）數(shù)據(jù)的動態(tài)曲線如下：
2.C反應(yīng)蛋白
C反應(yīng)蛋白（CRP）是機體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥性刺激時肝細胞合成的急性時相蛋白。
診療方案中的描述：多數(shù)患者C反應(yīng)蛋白升高；
常用儀器：全自動特定蛋白分析儀
全自動化程度：高，樣本直接上機檢測，批量進樣
樣本及用量：靜脈全血，5歲以下兒童可用手指末梢血；一般需10-30微升
檢測時間：單樣本5分鐘內(nèi)，門診30分鐘內(nèi)可拿到報告單
實驗室開展要求：基礎(chǔ)檢測項目，通常與血常規(guī)一起檢測
開展難度：★☆☆☆☆（非常容易）
CRP在健康人血清中濃度很低（<5mg/L），而在細菌感染或組織損傷時，其濃度顯著升高。CRP濃度在炎癥6小時左右升高，48小時即可達峰值，隨著病變消退、組織、結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)降至正常水平。此反應(yīng)不受放療、化療、皮質(zhì)激素治療的影響。因此，CRP的檢測在臨床應(yīng)用相當廣泛。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：多數(shù)患者C反應(yīng)蛋白升高（≥10mg/L），嚴重患者升高更明顯。非重癥患者中≥10mg/L有56.4%，重癥患者中≥10mg/L有81.5%，平均升高比例為60.7%[3]。
3.血清淀粉樣蛋白A
血清淀粉樣蛋白A（SAA）是急性時相反應(yīng)蛋白之一，屬于高敏度脂蛋白，是載脂蛋白家族中的異質(zhì)類蛋白質(zhì)，在炎癥發(fā)生時被高度誘導(dǎo)，在宿主防御中起著重要作用。
常用儀器：全自動特定蛋白分析儀
全自動化程度：高，樣本直接上機檢測，批量進樣
樣本及用量：靜脈全血，5歲以下兒童可用手指末梢血；一般需10-30微升
檢測時間：單樣本5分鐘內(nèi)，門診30分鐘內(nèi)可拿到報告單
實驗室開展要求：基礎(chǔ)檢測項目，通常與血常規(guī)和CRP一起檢測
開展難度：★☆☆☆☆（非常容易）
正常人體內(nèi)的SAA含量較低，機體受到刺激后（炎癥、感染、損傷、腫瘤等）產(chǎn)生一系列細胞因子，SAA由被激活的巨噬細胞和纖維母細胞快速大量合成和釋放進入血液中。
SAA 濃度在感染3~6 h 開始升高，半衰期約50 min，升高幅度可達正常值的10~1000倍。清除病原體后又可迅速的降低至正常水平，是反映機體感染情況和炎癥恢復(fù)的靈敏指標。特別是SAA在多種病毒感染急性期都有較顯著的升高，可用于對細菌、病毒等感染性疾病輔助診斷及病情的監(jiān)測。SAA聯(lián)合CRP檢測可對病毒和細菌感染的早期識別提供更好依據(jù)。
近年來，因“血常規(guī)+CRP+SAA”新三大常規(guī)檢測概念的提出，所以也作為常規(guī)項目在此介紹。新冠肺炎診療方案中暫無該項目的描述。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：柳州市柳鐵中心醫(yī)院檢驗科研究數(shù)據(jù)：患者1月25日核酸檢測結(jié)果陽性確診為新型冠狀病毒肺炎，SAA結(jié)果在感染早期即有明顯升高，最高達290.3mg/L，經(jīng)積極治療后，1月31日該患者復(fù)查核酸檢測結(jié)果陰性，2月1日SAA結(jié)果開始下降，并在2月4日降到正常范圍。
SAA變化情況
1.SAA在診療中的變化情況
2.SAA和其它炎癥指標變化對比
二、根據(jù)病情需監(jiān)測指標
1.凝血功能-D-二聚體
纖溶酶可分解纖維蛋白原和纖維蛋白，此酶是纖維蛋白溶解的關(guān)鍵酶。因此，纖維蛋白原和纖維蛋白降解產(chǎn)物的測定是纖維蛋白溶解增高(高纖溶狀態(tài))的標志性指標。
診療方案中的描述：嚴重者D-二聚體升高；對于一般治療建議根據(jù)病情監(jiān)測凝血功能。
常用方法和儀器：凝集法或免疫比濁法為主：凝血儀、生化儀、特定蛋白儀等；
全自動化程度：全自動凝血儀自動程度高，批量進樣
樣本及用量：枸櫞酸鈉抗凝血漿或全血；一般需10-30微升
檢測時間：單樣本7-15分鐘內(nèi)
實驗室開展要求：凝血項目，中心實驗室/急診檢驗室
開展難度：★★☆☆☆（較容易）
通常纖維蛋白在因子ⅩⅢa的作用下交聯(lián)在血管壁上。這種交聯(lián)的纖維蛋白在裂解時產(chǎn)生具有特異性的D-二聚體。
《新型冠狀病毒肺炎相關(guān)靜脈血栓栓塞癥防治建議》中，對于NCP住院患者，如果有條件，應(yīng)該監(jiān)測D-二聚體或其他凝血指標的動態(tài)變化，肺炎早期D-二聚體的升高可能和炎癥反應(yīng)有關(guān)，急劇的突然升高，并伴有呼吸衰竭表現(xiàn)，往往提示急性炎癥反應(yīng)風暴，提示病情進展。隨著病情的控制，D-二聚體逐漸下降并恢復(fù)正常。
如果NCP控制穩(wěn)定，而D-二聚體進行性升高，或者D-二聚體在恢復(fù)過程中又進行性升高，如果沒有原發(fā)病進展的證據(jù)，應(yīng)該考慮完善雙下肢靜脈超聲除外下肢深靜脈血栓形成（DVT），如果有上肢或上腔靜脈置管，應(yīng)該完善上肢靜脈超聲檢查除外上肢DVT。
在危重癥NCP救治過程中，少數(shù)患者會使用ECMO，適宜的抗凝強度和ECMO流量，對于DVT有一定的預(yù)防作用，在ECMO運行期間應(yīng)該注意血栓和出血的平衡，并進行VTE的動態(tài)監(jiān)測和管理。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：非重癥患者升高比例43.2%，重癥患者升高比例59.6%，平均升高比例為46.4%[3]。武漢大學(xué)中南醫(yī)院在JAMA上發(fā)表的138例患者研究[4]中，分析33 例 NCP 患者（5 例非存活者和 28 例存活者）數(shù)據(jù)，相較于存活患者的D-二聚體結(jié)果，死亡患者D-二聚體水平不斷上升，7-9天突破正常值，且此后維持在較高水平。
2.心肌損傷標志物肌酸激酶（CK）是一種二聚體酶，能可逆催化肌酸和三磷酸腺苷生成磷酸肌酸和二磷酸腺苷的反應(yīng)，是細胞能量代謝的關(guān)鍵酶。
診療方案中的描述：部分患者乳酸脫氫酶、肌酶和肌紅蛋白增高；部分危重者可見肌鈣蛋白增高；
常用儀器：（肌酶）生化儀、（肌鈣蛋白、肌紅蛋白、CK-MB質(zhì)量）化學(xué)發(fā)光儀
全自動化程度：全自動儀器可批量進樣
樣本及用量：血清
檢測時間：單樣本1個小時內(nèi)（含樣本離心獲得血清時間）
實驗室開展要求：中心實驗室/急診檢驗室
開展難度：★★☆☆☆（較容易）
肌酸激酶由M和B兩個亞基組成，可形成CK-MM、CK-MB和CK-BB三種同工酶，另外在心肌和骨骼肌細胞線粒體中存在CK-MiMi。其中，CK-MB主要存在于心肌中。急性心肌梗塞胸痛發(fā)作后4～6小時，病人血清CK-MB先于總活性開始升高，12～36小時達峰值；多在72小時內(nèi)恢復(fù)正常。其最高值達對照組4.9～22倍以上。
CK及CK-MB、谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、乳酸脫氫酶同工酶1是傳統(tǒng)的心肌酶譜檢測項目，在生化分析儀上開展，測得的是酶的活性。其中生化上CK-MB的檢測方法是免疫抑制法，通過抑制M亞基，測B亞基活性，結(jié)果乘2即得CK-MB活性，此法受干擾因素多，易出現(xiàn)假陽性值�，F(xiàn)CK-MB質(zhì)量測定受干擾因素小，通過免疫化學(xué)發(fā)光技術(shù)檢測，在胸痛發(fā)作的最初6h內(nèi)CK-MB質(zhì)量的敏感性明顯優(yōu)于CK-MB活性檢測。
肌紅蛋白（Myo），肌肉組織中儲存氧，在肌肉運動需要能量時是能量供給的生成系統(tǒng),心肌輕度受損即從心肌細胞直接進入血液循環(huán)。分子量小、快速進入血液、心梗1～2h后就開始升高，4～6小時即達高峰。
肌鈣蛋白（cTn）分為T和I兩種亞型，在心肌損傷早期，胞質(zhì)中游離的cTnT和cTnI會快速釋放到血液中，4-6h后，即可在血液中升高，升高的肌鈣蛋白能在血液中保持5-10天。肌鈣蛋白是目前診斷AMI的血清“金標準”，尤其對不能通過心電圖的改變診斷和無臨床典型癥狀的微小心損患者，是最佳輔助診斷指標。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：醫(yī)學(xué)雜志《柳葉刀》于1月24日發(fā)表的對41例患者研究中，急性心臟損傷有5例，占12%，這5例出現(xiàn)了肌鈣蛋白I（cTnI）明顯升高[6]�！读~刀》1月29日發(fā)表的99例患者研究中，肌紅蛋白升高有15例（15%）[7]。
3.肝功、腎功
肝功能檢查項目通常包括：谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白以及總膽紅素的檢查。
腎功能檢查項目主要是指血液中肌酐、尿素和尿酸三項。其中血肌酐是腎功能最主要的指標，反應(yīng)腎功能工作狀況。
診療方案中的描述：部分患者可出現(xiàn)肝酶增高；
常用儀器：全自動生化分析儀
全自動化程度：全自動儀器可批量進樣
樣本及用量：血清
檢測時間：單樣本1個小時內(nèi)（含樣本離心獲得血清時間）
實驗室開展要求：中心實驗室
開展難度：★★☆☆☆（較容易）
肝功能檢查方法可以幫助患者及早地發(fā)現(xiàn)和診斷某些疾病。肝功能檢查能夠了解自身的肝臟健康狀況，及早發(fā)現(xiàn)病情，遏制其發(fā)展惡化。另外對于肝功能的檢查時十分必要的，因為肝臟是人體最大的實質(zhì)性器官，擔負著多樣的生理功能。當各種疾病引起肝細胞損害時，可引起肝細胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝的異常，導(dǎo)致血液中與肝臟有關(guān)的代謝產(chǎn)物和酸含量改變。
臨床上檢查肝功能的目的在于探測肝臟有無疾病，肝臟損害程度以及查明肝病原因，判斷預(yù)后和鑒別發(fā)生黃疸的病因等。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：鐘南山團隊在MedRxiv預(yù)印版發(fā)表的1099例臨床資料[3]中，部分生化指標數(shù)據(jù)：乳酸脫氫酶(Lactose dehydrogenase)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase)、總膽紅素(Total bilirubin)、肌酸激酶(Creatinine kinase，CK)、肌酐(Creatinine)等見下表。
武漢大學(xué)中南醫(yī)院在JAMA上發(fā)表的研究[4]中，分析33 例 NCP 患者（5 例非存活者和 28 例存活者）數(shù)據(jù)，未存活患者死亡前血尿素和血肌酐水平迅速升高。
4.血氣分析
血氣分析（Blood gas analysis，BG）是通過測定人體血液的H+濃度和溶解在血液中的氣體（主要指CO2、O2），來了解人體呼吸功能與酸堿平衡狀態(tài)的一種手段，它能直接反映肺通氣和換氣功能及機體的酸堿平衡狀態(tài)。
診療方案中的描述：根據(jù)病情監(jiān)測動脈血氣分析，呼吸支持、機型通氣患者需監(jiān)測；重型患者臨床分型指標之一；
動脈血氧分壓（PaO2）/吸氧濃度（FiO2）≤300mmHg；
常用儀器：血氣分析儀
全自動化程度：不能批量上樣，手動放置樣本
樣本及用量：動脈全血，樣本一般在30分鐘內(nèi)檢測
檢測時間：單樣本3分鐘內(nèi)
實驗室開展要求：重癥監(jiān)護室、中心檢驗室
開展難度：★★★☆☆（有難度）
血氣分析可直接測定參數(shù)動脈氧分壓(PO2)、動脈二氧化碳分壓(PCO2)、動脈氫離子濃度(pH)，及Na+、K+、Cl-、Ca++等電解質(zhì)項目并推算出一系列參數(shù)。
適用于：低氧血癥和呼吸衰竭的診斷；呼吸困難的鑒別診斷；昏迷的鑒別診斷；手術(shù)適應(yīng)癥的選擇；呼吸機的應(yīng)用、調(diào)節(jié)、撤機；呼吸治療的觀察；酸堿失衡的診斷等。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：武漢大學(xué)中南醫(yī)院在JAMA上發(fā)表的研究[4]中，重癥患者PaO2下降明顯，存在低氧血癥。
5.血糖、乳酸
血糖（Glu）升高是重癥患者常見的病理現(xiàn)象。多年來，諸多的基礎(chǔ)和臨床研究得到幾乎一致的認識，就是高血糖是危重患者的獨立死亡危險因素之一。
乳酸（Lac）是體內(nèi)糖代謝的中間產(chǎn)物。在某些病理情況下(如呼吸衰竭或循環(huán)衰竭時)，可引起組織缺氧，由于缺氧可引起體內(nèi)乳酸升高。
診療方案中的描述：重癥患者組織氧合指標乳酸進行性升高；
常用儀器：生化分析儀、（重癥可使用）血氣分析儀
全自動化程度：不能批量上樣，手動放置樣本
樣本及用量：靜脈血漿、動脈全血
實驗室開展要求：中心檢驗室、重癥監(jiān)護室
開展難度：★★★☆☆（有難度）
人們可以通過合理或嚴格血糖控制，顯著降低多種疾病并發(fā)癥的發(fā)生率和病死率。
另外，人體內(nèi)葡萄糖代謝過程中，如糖酵解速度增加，劇烈運動、脫水時，也可引起體內(nèi)乳酸升高。體內(nèi)乳酸升高可引起乳酸中毒。檢查血乳酸水平，可提示潛在疾病的嚴重程度。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：《柳葉刀》線上1月29日發(fā)表的99例患者研究中[7]，血糖平均7.4mmol/L（正常參考區(qū)間3.9-6.1 mmol/L），51例（52%）患者血糖升高，僅1例患者血糖降低。
6.降鈣素原
降鈣素原（PCT）是全身性細菌感染及膿毒癥的診斷標志物，并可用于輔助鑒別細菌感染和病毒感染。
診療方案中的描述：多數(shù)患者降鈣素原正常；
常用儀器：化學(xué)發(fā)光分析儀
全自動化程度：高、批量進樣
樣本及用量：靜脈血清/血漿
實驗室開展要求：中心檢驗室、急診檢驗室
開展難度：★★☆☆☆（較容易）
當人體受到細菌感染時，細菌被免疫細胞分解所產(chǎn)生的脂多糖會刺激機體產(chǎn)生白介素、腫瘤壞死因子等細胞因子，繼而促進體內(nèi)脂肪細胞大量分泌PCT；當人體受到病毒感染時，機體受到病毒刺激產(chǎn)生干擾素（INF-γ），而INF-γ的產(chǎn)生則會抑制PCT的生成。可以利用細菌感染后降鈣素原（PCT）升高的特點，將一部分細菌性肺炎患者早期鑒別出來進行對癥治療。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：《柳葉刀》于1月24日發(fā)表的對41例患者研究[6]中，多數(shù)患者入院時血清降鈣素原水平正常，四名ICU患者發(fā)生繼發(fā)感染，其中三名降鈣素原大于0.5ng/ml。《柳葉刀》線上1月29日發(fā)表的99例患者研究[7]中，其中4例（4%）膿毒性休克；6例患者（6%）降鈣素原高于正常范圍。
三、病情惡化指標應(yīng)警惕指標
除前述根據(jù)病情應(yīng)監(jiān)測的項目外，還有以下指標變化應(yīng)警惕病情變化：
1.細胞因子
細胞因子（Cytokine, Ck）由免疫細胞（如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等）和某些非免疫細胞（內(nèi)皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等）經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)。
診療方案中的描述：重型、危重型患者常有炎癥因子升高；有條件者可行細胞因子檢測；
常用儀器：流式細胞儀
全自動化程度：低，操作復(fù)雜
樣本：血清
實驗室開展要求：免疫學(xué)實驗室（尚未在臨床診斷上廣泛開展，多為科研實驗）
開展難度：★★★★☆（較難）
細胞因子一般通過結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細胞生長、分化和效應(yīng)，調(diào)控免疫應(yīng)答。
細胞因子可被分為白細胞介素（如IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14等）、干擾素（如IFN-γ）、腫瘤壞死因子超家族（如TNF-β）、集落刺激因子（如GM-CSF）、趨化因子、生長因子等。細胞因子的檢測是基礎(chǔ)免疫研究的有效手段，在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監(jiān)測方面有重要價值。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：《柳葉刀》于1月24日發(fā)表的對41例患者研究[6]中，對比了NCP（新冠肺炎）患者中的ICU患者（n=13），非ICU患者(n=28)，以及健康人(n=4)的細胞因子濃度，各類細胞因子在ICU組升高明顯高于非ICU組，并且都高于健康對照組。
2.白細胞介素-6
白介素6（IL-6）是一種細胞因子，在人體急性炎癥反應(yīng)鏈中處于中心地位，誘導(dǎo)產(chǎn)生CRP和PCT等多種主要炎癥因子。
診療方案中的描述：重型、危重型患者常有炎癥因子升高；有條件者可行細胞因子檢測。對于雙肺廣泛病變者及重型患者，且實驗室檢測IL-6水平升高者，可試用托珠單抗治療。
常用儀器：化學(xué)發(fā)光分析儀
全自動化程度：高
樣本：血清
實驗室開展要求：中心檢驗室
開展難度：★★☆☆☆（較容易）
由于IL-6在炎癥介質(zhì)網(wǎng)絡(luò)中的重要作用，血液中的IL-6濃度水平在多種臨床疾病的病理過程早期均會出現(xiàn)明顯升高，這些疾病主要包括細菌感染、新生兒敗血癥、膿毒血癥、呼吸系統(tǒng)衰竭等。在多種細胞因子中臨床意義最顯著，可用常規(guī)方法在臨床廣泛開展。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：《柳葉刀》1月29日發(fā)表的99例患者研究[7]中，有超過半數(shù)（52%）的患者IL-6升高。一些重癥的患者體內(nèi)產(chǎn)生了嚴重的細胞因子風暴，其中體內(nèi)IL-6甚至達到了413.6pg/mL[8]。
3.淋巴細胞亞群
外周血淋巴細胞根據(jù)生物學(xué)功能和細胞表面抗原表達分為3個群：T淋巴細胞（CD3+）、B淋巴細胞（CD19+）和NK淋巴細胞。
診療方案中的描述：以下指標變化應(yīng)警惕病情變化：外周血淋巴細胞計數(shù)進行性降低；淋巴細胞中B淋巴細胞明顯降低，CD4及CD8 T細胞不斷下降；
常用儀器：流式細胞儀
全自動化程度：低，操作復(fù)雜
樣本：靜脈全血
實驗室開展要求：免疫學(xué)實驗室（尚未在臨床診斷上廣泛開展，多為科研實驗）
開展難度：★★★★☆（較難）
T細胞表面可表達多種分化抗原（CD）分子，如CD45、CD3、CD4、CD8、CD5等，這些膜分子對T細胞的檢測、T細胞對抗原的特異性識別和應(yīng)答，以及T細胞與其他免疫細胞之間的相互作用等都有著不同的生物學(xué)作用。T細胞參與細胞免疫反應(yīng)，B細胞參與體液免疫反應(yīng)。
淋巴細胞亞群分析是檢測細胞免疫和體液免疫功能的重要指標，其總體反應(yīng)機體當前的免疫功能、狀態(tài)和平衡水平，并可輔助診斷某些免疫缺陷性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病，分析發(fā)病機制，觀察療效及監(jiān)測預(yù)后。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：《柳葉刀》2月17日發(fā)表首例對新冠肺炎死亡患者病理解剖的分析報告[9]中，外周血流式細胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，外周血CD4+和CD8+細胞的數(shù)量大大減少，而它們的狀態(tài)卻被過度激活。CD4+T細胞中具有高度促炎效應(yīng)的CCR4+ CCR6+ Th17細胞增加。此外，發(fā)現(xiàn) CD8+T細胞有高濃度的細胞毒性顆粒，其中31.6％的細胞為穿孔素陽性，64.2％細胞為顆粒溶素陽性，30.5％細胞為顆粒溶素和穿孔素雙陽性(附錄p3)。我們的結(jié)果表明，以Th17的增加和CD8+T細胞的高細胞毒性為表現(xiàn)的T細胞過度活化，能夠部分地解釋該患者的嚴重免疫損傷。
四、臨床確診指標
1.病毒核酸檢測
所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)，新型冠狀病毒是一種RNA病毒，通過鑒定病毒中的保守RNA序列可以將其與其他病原體進行區(qū)分。
診療方案中的描述：病原學(xué)確診證據(jù)之一：采用RT-PCR或/和NGS方法在鼻咽拭子、痰和其他下呼吸遞分泌物、血液、糞便等標本中可檢測出新型冠狀病毒核酸。檢測下呼吸道標本（痰或氣道抽取物）更加準確。標本采集后盡快送檢。
常用儀器：核酸檢測分析系統(tǒng)
全自動化程度：低，操作復(fù)雜、步驟多、耗時長
樣本：咽拭子、痰液、呼吸道分泌物
檢測時間：1個工作日
實驗室開展要求：核酸檢測實驗室
開展難度：★★★★☆（較難）
檢測新型冠狀病毒特異序列的方法最常見的是熒光定量PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）。因PCR反應(yīng)模板僅為DNA，因此在進行PCR反應(yīng)前，應(yīng)將新型冠狀病毒核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為DNA。在PCR反應(yīng)體系中，包含一對特異性引物以及一個Taqman探針，該探針為一段特異性寡核苷酸序列，兩端分別標記了報告熒光基團和淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；如反應(yīng)體系存在靶序列，PCR反應(yīng)時探針與模板結(jié)合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解，報告基團與淬滅基團分離，發(fā)出熒光。每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子產(chǎn)生。
熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測出熒光到達預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)（Ct值）與病毒核酸濃度有關(guān)，病毒核酸濃度越高，Ct值越小。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽性判斷值。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院院長王辰院士2月5日接受央視采訪時曾表示，“這個病有個特點，并不是所有患病者都能檢測出核酸陽性。對于真是這個病的病人，也不過只有30%-50%的陽性率�！�
2.病毒基因測序
病原宏基因組測序（mNGS）是目前臨床上針對病原最常用的基因測序方法，是一種基于二代測序技術(shù)的無需培養(yǎng)、無偏好性的病原檢測技術(shù)，可一次性完成細菌、真菌、病毒和寄生蟲等多種病原體檢測。
診療方案中的描述：病原學(xué)確診證據(jù)之一：病毒基因測序，與已知的新型冠狀病毒高度同源；
常用儀器：測序儀
全自動化程度：低，需先進行核酸提取
樣本：血液、痰液、肺泡灌洗液、組織液、拭子等
檢測時間：1周內(nèi)
實驗室開展要求：臨床基因擴增實驗室
開展難度：★★★★★（高難度）
此次疫情中，病原宏基因組測序 （mNGS）利用其技術(shù)優(yōu)勢，在五天內(nèi)就鑒定并分析出新型冠狀病毒的基因組，而2003年SARS的鑒定耗時5月余、2013年H7N9的鑒定耗時1月余。因此，病原宏基因組測序 （mNGS）為本次疫情感染病原體的進一步確認以及防控爭取了時間，也為后續(xù)的臨床診斷、治療和藥物研發(fā)指明了方向[10]。
新冠肺炎患者臨床研究數(shù)據(jù)：2020年1月10日，上海市公共衛(wèi)生臨床中心和公共衛(wèi)生學(xué)院與華中科技大學(xué)武漢市中心醫(yī)院、武漢市疾病預(yù)防控制中心、國家傳染病預(yù)防控制所、中國疾病預(yù)防控制中心和澳大利亞悉尼大學(xué)合作，公開了2019冠狀病毒基因組。
經(jīng)數(shù)據(jù)分析，2019-nCoV與2003年爆發(fā)的SARS病毒基因組序列相似度為80%，與2017年2月從國內(nèi)的蝙蝠中采集到的Bat SARS-like coronavirus isolate bat-SL-CoVZC45基因組序列相似性最高，相似度為88%。對2019-nCoV病毒株的基因組變異分析為追溯病毒來源、追蹤病毒株變異路徑、防控新型冠狀病毒引發(fā)的疫情、治療病毒性肺炎提供重要的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)與決策支持。
3.病毒抗體檢測
IgM、IgG是機體對于病毒免疫應(yīng)答的關(guān)鍵組成部分，臨床上血清IgM、IgG抗體檢測是病毒感染非常必要的、常規(guī)的實驗室檢查手段，比如乙肝病毒、丙肝病毒等，都是通過檢測病毒刺激機體后產(chǎn)生的血清抗體來輔助診斷。
診療方案中的描述：血清學(xué)檢查：新型冠狀病毒特異性IgM抗體多在發(fā)病3-5天后開始出現(xiàn)陽性，IgG抗體滴度恢復(fù)期較急性期有4倍及以上增高。血清學(xué)確診證據(jù)：
常用儀器：無需儀器，或免疫分析儀
全自動化程度：低
樣本：靜脈全血、血清
檢測時間：操作簡便，15分鐘可完成檢測
實驗室開展要求：一般門診檢驗室
開展難度：★☆☆☆☆（非常容易）
一般來說，最早產(chǎn)生的抗體是IgM，在機體受病原刺激一周左右出現(xiàn)，IgM持續(xù)時間較短。而后產(chǎn)生IgM的B細胞進入淋巴結(jié)，在生發(fā)中心接受輔助性T細胞和抗原提呈細胞的刺激，進一步成熟分化為漿細胞，大量產(chǎn)生IgG，IgG持續(xù)時間較長。因此，往往IgM抗體陽性表示近期感染，IgG抗體陽性表示感染時間較長或既往感染。
針對新冠病毒的特異性抗體檢測，可用膠體金或化學(xué)發(fā)光法測病毒IgM及IgG，可在患者感染第7天或發(fā)病第3天就檢測出來，對于進一步的確診會很有幫助。
通過這些檢測指標的分類介紹，是否更好的了解每項檢查的意義了呢？從這些指標也可以看出患者初期就診首先進行常規(guī)檢查，結(jié)合合并并發(fā)癥的相關(guān)檢查、臨床癥狀和其他輔助檢測（如CT）手段及流行病學(xué)調(diào)查等，可以進行初步診斷；然后對疑似患者進行確診檢查；對危重癥患者動態(tài)監(jiān)測，觀察病情變化。
【參考文獻】
1. 《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》
2. 《新型冠狀病毒肺炎重型、危重型病例診療方案（試行第二版）》
3. Guan W, Ni Z, Hu Y, et al. Clinical characteristics of 2019 novel coronavirus infection china. MedRxiv preprint, 2020,2,6.
4. Wang D, Hu B, Hu C, et al. Clinical Characteristics of 138 Hospitalized Patients With 2019 Novel Coronavirus–Infected Pneumonia in Wuhan, China. JAMA, Online February 7, 2020.
5. 新型冠狀病毒肺炎相關(guān)靜脈血栓栓塞癥防治建議（試行）. 中華醫(yī)學(xué)雜志, 2020,100(00) : E007-E007.
6. Huang C, Wang Y, Li X,et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet. 2020 Jan 24.
7. Chen N, Zhou M, Dong X, et al.Epidemiological and clinical characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in Wuhan, China: a descriptive study. Lancet 2020, 395: 507–13.
8. Fang Y, Zhang H, Xu Y, et al. CT Manifestations of Two Cases of 2019 Novel Coronavirus(2019-nCoV) Pneumonia. 2020 Feb 7.
9. Xu Z, Shi L, Wang Y, et al. Pathological findings of COVID-19 associated with acute respiratory distress syndrome. Lancet. 2020 Feb 17.
10. 陶悅、傅啟華、莫茜等. 病原宏基因組測序在新型冠狀病毒檢測中的應(yīng)用與挑戰(zhàn). 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2020,43:網(wǎng)絡(luò)預(yù)發(fā)表.
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