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側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)是20世紀(jì)90年代在單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新型體外診斷技術(shù)，具有快速、簡(jiǎn)便、單人份檢測(cè)、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)（圖1）,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢測(cè)、食品質(zhì)量監(jiān)測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)、出入境檢驗(yàn)檢疫、法醫(yī)定案等領(lǐng)域。

圖1：免疫層析試紙條

側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)以大孔徑的微孔濾膜（NC膜，硝酸纖維素膜）為載體，將特異性的抗原或抗體固定在NC膜上，當(dāng)待測(cè)樣品加到試紙條一端的樣品墊上后，通過(guò)毛細(xì)作用側(cè)向移動(dòng)，與結(jié)合墊上的膠體金或微球標(biāo)記的試劑發(fā)生特異的免疫反應(yīng)，再移動(dòng)到NC膜上，被固定在NC膜表面的抗原或抗體捕獲，聚集在檢測(cè)帶上，通過(guò)目測(cè)硝酸纖維素表面標(biāo)記物（膠體金或乳膠顆粒）的光反射信號(hào)的密度得到直觀的顯色結(jié)果。其它未結(jié)合的標(biāo)記物則越過(guò)檢測(cè)帶，流入吸水墊中，達(dá)到自動(dòng)分離的目的（圖2）。

圖2 免疫層析試紙條的結(jié)構(gòu)

隨著免疫檢測(cè)技術(shù)的飛速發(fā)展，定量、高靈敏度、多元檢測(cè)、系統(tǒng)集成化，開(kāi)始成為IVD領(lǐng)域新的研究方向熱點(diǎn)，與傳統(tǒng)的ELISA和膠體金定性側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)相比，基于微球的定量側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)具有穩(wěn)定性好，線性范圍寬，靈敏度高等諸多優(yōu)點(diǎn)。

制備Estapor納米微球的常用材質(zhì)為聚苯乙烯（PS）或者聚苯乙烯與其他化合物如二乙烯苯組成的復(fù)合材料。對(duì)于微球表面無(wú)任何功能基團(tuán)修飾的微球，抗原或抗體通過(guò)被動(dòng)吸附作用固定在微球表面，工藝簡(jiǎn)單。對(duì)于有功能基團(tuán)修飾的微球，抗原/抗體可通過(guò)共價(jià)交聯(lián)的方式固定在微球表面�？乖�/抗體的共價(jià)交聯(lián)方法主要有兩種，一種是兩步法，交聯(lián)前微球需先激活，例如-COOH羧基修飾的微球可用NHS/EDC活化；另一種是一步法，微球交聯(lián)前只需更換緩沖液的pH值即可活化，操作十分方便，如氯甲基、甲苯磺�；�、環(huán)氧基修飾的微球就屬于此類�？乖�或抗體偶聯(lián)到微球表面后可通過(guò)離心、透析或者超濾去除未交聯(lián)的抗體/抗原，然后再使用超聲重新分散。

微球是定量側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)的核心原料，對(duì)定量層析產(chǎn)品的性能有重要的影響，Micheal Mansfield 博士將于10月19日在2017默克生命科學(xué)體外診斷技術(shù)國(guó)際研討會(huì)和體外診斷行業(yè)研究者進(jìn)行分享。

Mansfield博士在馬薩諸塞州貝德福德MilliporeSigma至今已工作了28年，目前是Biosystems和Regulated Materials研發(fā)部的應(yīng)用開(kāi)發(fā)科學(xué)家。他最初專注于W、S和N印跡中生物分子與膜表面相互作用的研究，后來(lái)致力于使用離心過(guò)濾裝置處理樣品以及濃縮蛋白質(zhì)溶液的研究。在過(guò)去的18年中，他一直致力于研究在免疫診斷和醫(yī)療器械領(lǐng)域膜和其他多孔材料的應(yīng)用。    

2017默克生命科學(xué)體外診斷技術(shù)國(guó)際研討會(huì)

會(huì)議時(shí)間：10月19-20日

會(huì)議地點(diǎn)：上海喜瑪拉雅酒店

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