亚洲精品久久无码2021,偷拍亚洲另类无码专区制服,亚洲欧美性都花花世界,国产熟女的精品视频大全,色偷偷2025免费视频观看,撅着大腚SXMV色香视频

近幾年我國(guó)分子診斷技術(shù)的發(fā)展迅速，尤其是新一代測(cè)序技術(shù)（NGS）在無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)（NIPT）、人類遺傳基因檢測(cè)（HGT）、循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）基因分析以及其他疾病診斷方面已經(jīng)得以廣泛應(yīng)用。保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠除了需要精密的儀器、優(yōu)良的診斷試劑，用于這一類高精度分析檢測(cè)的標(biāo)本采集容器的質(zhì)量也不可忽視。 

液體活檢是指利用高通量測(cè)序技術(shù)來(lái)檢測(cè)人體體液標(biāo)本中的核酸（包括DNA、RNA、cfRNA、miRNA、ccfDNA）對(duì)遺傳、生殖、外來(lái)侵入等進(jìn)行定位、研究和監(jiān)控，為臨床和科研提供輔助診斷依據(jù)。目前應(yīng)用較為廣泛的利用NGS檢測(cè)血液循環(huán)游離DNA（Circulating Cell-free DNA，簡(jiǎn)稱ccfDNA）的分子診斷技術(shù)，就是通過(guò)捕獲存在于血漿中的循環(huán)游離DNA進(jìn)行測(cè)序，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供重要的診斷依據(jù)。只要血液中存在“外來(lái)”DNA，如來(lái)自胎兒的DNA會(huì)經(jīng)過(guò)胎盤進(jìn)入母親的血液；人體腫瘤細(xì)胞、凋亡細(xì)胞或者移植器官等的游離DNA也會(huì)進(jìn)入血液循環(huán)，均可利用液體活檢技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。鑒于ccfDNA的性質(zhì)，這種游離DNA可能難以定量，對(duì)于健康個(gè)體，它的產(chǎn)量大約在4ml血漿中1-100ng這個(gè)范圍。若是研究對(duì)象處于各種疾病狀態(tài)或是女性處于孕期，則ccfDNA的濃度會(huì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個(gè)范圍。血液標(biāo)本在采集后如果沒(méi)有合適的儲(chǔ)存容器、合理的提取純化過(guò)程，往往會(huì)導(dǎo)致血液細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA（gDNA）釋放到血漿中，對(duì)ccfDNA造成稀釋，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的偏差；由于ccfDNA含量極少，如果采集容器的穩(wěn)定劑不能消除DNA分解酶（Dnase）或者血液受到細(xì)菌等微生物污染也會(huì)導(dǎo)致結(jié)果偏差；另外，一些血液采集容器的添加劑（如抗凝劑、穩(wěn)定劑等）會(huì)對(duì)DNA有修飾作用，造成ccfDNA峰位移，更會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏差。因此，要想液體活檢真正做到精準(zhǔn)，選擇合適的采集容器是至關(guān)重要的第一步。

目前，用于分子診斷的標(biāo)本采集容器除了血液采集容器（真空采血管）以外，還有唾液采集容器、口腔粘膜細(xì)胞采集器、尿液采集容器、糞便采集容器、痰液采集容器、宮頸細(xì)胞刷、鼻咽拭子、腦脊液采集容器、骨髓采集容器、病理組織保存容器、血液采集卡、DNA樣本存儲(chǔ)卡（FTA卡）等等。其作用主要是采集并穩(wěn)定樣本中的核酸，而核酸分為DNA和RNA，DNA存在于細(xì)胞核中，RNA存在于細(xì)胞質(zhì)。如何讓這些既微量又珍貴的信使保持原始性、純潔性呢？一是標(biāo)本采集容器本身應(yīng)潔凈沒(méi)有污染；二是采集容器的添加劑應(yīng)能保持樣本內(nèi)核酸的穩(wěn)定并耐受一定溫度影響；三是采集容器應(yīng)密閉、耐壓，可以適應(yīng)長(zhǎng)途運(yùn)輸；另外，采集容器的添加劑不能過(guò)度稀釋標(biāo)本，也不能對(duì)后續(xù)的核酸提取純化造成不當(dāng)影響�，F(xiàn)在市場(chǎng)上各類標(biāo)榜可以用于液體活檢的標(biāo)本采集容器五花八門，品質(zhì)良莠不齊，往往魚目混珠。比如用于NIPT（無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)）的循環(huán)游離DNA采血管，市場(chǎng)上售價(jià)在10元-100余元價(jià)格不等，多數(shù)沒(méi)有經(jīng)過(guò)藥監(jiān)部門的注冊(cè)審批，有的進(jìn)口產(chǎn)品既沒(méi)有取得生產(chǎn)國(guó)的產(chǎn)品注冊(cè)市場(chǎng)準(zhǔn)入，也沒(méi)有我國(guó)藥監(jiān)部門的進(jìn)口許可；還有一些生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品只有單一的抗凝劑，并沒(méi)有核酸穩(wěn)定組分或者穩(wěn)定劑配方不合理，多數(shù)產(chǎn)品在應(yīng)用核酸蛋白檢測(cè)儀對(duì)樣本提取的DNA進(jìn)行檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)A260/A280小于1.7，說(shuō)明DNA的純度不高；還有的采血管內(nèi)的試劑嚴(yán)重修飾DNA，應(yīng)用生物分析儀進(jìn)行測(cè)定時(shí)發(fā)現(xiàn)，ccfDNA峰位移嚴(yán)重，造成樣本檢測(cè)數(shù)據(jù)失真；更有甚者，有的采血管已經(jīng)被微生物污染，根本無(wú)法分離出屬于人體的純凈DNA。因此，選擇ccfDNA采集管時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：采血后不能有標(biāo)本溶血，以防止gDNA釋放稀釋ccfDNA；采血管內(nèi)的穩(wěn)定劑應(yīng)能夠抑制或消除Dnase，以防分解ccfDNA，降低檢出率；采血管內(nèi)容物不能被細(xì)菌污染，以防DNA失真；采血管的添加劑組分不能修飾DNA，造成ccfDNA峰位移；采集容器應(yīng)具備密閉性并有一定強(qiáng)度，以免造成運(yùn)輸破損；添加劑不能過(guò)度稀釋標(biāo)本，也不能對(duì)后續(xù)的提取純化造成不當(dāng)影響，更不能影響下游試驗(yàn)。另外，用于臨床診斷標(biāo)本采集的的真空采血管還應(yīng)取得合法的醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊(cè)證。

使用者在選擇了質(zhì)量合格的采集容器以后還應(yīng)注意以下問(wèn)題：

1、嚴(yán)格按照生產(chǎn)廠家的使用說(shuō)明書正確采集、分離、儲(chǔ)存、運(yùn)輸標(biāo)本，必須清楚不同采集容器的分類及用途。比如用于核酸提取純化或下游試驗(yàn)的核酸類采血管主要包括血液RNA管、血液DNA管（這兩種采血管用于穩(wěn)定基因組RNA或DNA，最終使用的樣本是全血）；血液cfRNA管、血液ccfDNA管（這兩種采血管用于穩(wěn)定游離RNA或循環(huán)游離DNA，最終使用的樣本是血漿）。用于基因組核酸采集保存的血液RNA管和血液DNA管在采血管后應(yīng)充分混勻，在室溫平衡不少于2小時(shí)，不多于72小時(shí)，可以轉(zhuǎn)移至-20℃保存。若需轉(zhuǎn)移至-70℃或-80℃保存，則需要在-20℃凍存至少24小時(shí)再轉(zhuǎn)移。如果采集后需要立即運(yùn)輸至異地，則應(yīng)注意標(biāo)本的運(yùn)輸時(shí)間在室溫下（15-25℃）可以穩(wěn)定3天，2-8℃穩(wěn)定5天，但超過(guò)35℃不應(yīng)多于24小時(shí)，最高運(yùn)輸溫度不能超過(guò)40℃。對(duì)于血液cfRNA管和ccfDNA管應(yīng)注意采集過(guò)程中不能有溶血，采血后充分混勻，可以立即分離血漿（注意盡量使用水平離心機(jī)，離心力1900g，離心時(shí)間10分鐘），也可以室溫（15-25℃）保存或運(yùn)輸（溫度不宜超過(guò)35℃）7天內(nèi)再分離血漿，在吸取血漿時(shí)應(yīng)注意不要吸入血漿下層的血液有形成分沉淀。如果采集后立即分離血漿，可以凍存后復(fù)融再二次離心。 

2、如果需要提取純化核酸則要選擇合適的試劑盒。目前，市場(chǎng)上銷售的核酸提取試劑主要包括鹽析沉淀法、硅膜吸附法和磁珠法。由于不同廠家生產(chǎn)的標(biāo)本采集容器所使用的添加劑并不相同，試劑中的一些組分在提取純化過(guò)程中可能會(huì)形成干擾。因此，最好使用同一體系（采集容器與提取試劑配套），以獲取最佳效果。

3、任何匹配性試驗(yàn)都要經(jīng)過(guò)合適的驗(yàn)證過(guò)程，以判斷標(biāo)本采集容器提供的檢體樣本是否完全適合下游的試驗(yàn)。如腫瘤循環(huán)DNA檢測(cè)需要提取的ctDNA（Circulating Tumor Cells DNA）本身含量就少，只占循環(huán)DNA總量的1%-0.01%，如果采集保存不當(dāng)，就會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)失真。

總之，液體活檢技術(shù)的應(yīng)用可以促進(jìn)醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展造福人類，需要多個(gè)細(xì)分行業(yè)的充分配合，應(yīng)充分整合資源促進(jìn)技術(shù)進(jìn)步，推動(dòng)精準(zhǔn)醫(yī)療的實(shí)現(xiàn)。

（力因精準(zhǔn)醫(yī)療產(chǎn)品（上海）有限公司 供稿)

(作者：朱德新）