
帕金森。≒arkinson’s disease,PD)是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,為老年人所多見。
DJ-1是帕金森病的典型生物標(biāo)志物,該標(biāo)志物及各種修飾異構(gòu)體的檢測(cè)定量對(duì)于臨床診斷及治療評(píng)估十分重要。但該蛋白及異構(gòu)體的檢測(cè)非常困難,傳統(tǒng)方法基于雙向電泳及液質(zhì)聯(lián)用,重復(fù)性差,定量困難,動(dòng)態(tài)范圍低等,因此限制了該疾病的深入研究。
美國Protein Simple公司生產(chǎn)了一種名叫NanoPro1000的全新檢測(cè)平臺(tái),通過毛細(xì)管等點(diǎn)聚集技術(shù),成功定量檢測(cè)到腦樣品中各種復(fù)雜DJ-1異構(gòu)體。技術(shù)上,NanoPro1000采用革新的毛細(xì)管等點(diǎn)聚焦技術(shù),DJ-1在兩性電解質(zhì)中進(jìn)行自動(dòng)化電泳,不同的修飾異構(gòu)體根據(jù)各自等電點(diǎn)得以分開,然后利用通用抗體進(jìn)行雜交識(shí)別,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)不同異構(gòu)體的檢測(cè)及定量。整個(gè)平臺(tái)自動(dòng)化程度高,放置樣品及抗體后整個(gè)系統(tǒng)自動(dòng)運(yùn)行,直至產(chǎn)生最終結(jié)果,克服了眾多人工步驟所導(dǎo)致的重復(fù)性及重現(xiàn)性差等缺點(diǎn);檢測(cè)通量高,最高可達(dá)96個(gè)樣品/次,因此適合檢測(cè)大量不同處理設(shè)計(jì)后的樣品,如對(duì)照組與處理組,處理組的不同劑量等;另外,系統(tǒng)的S/N值及動(dòng)態(tài)范圍都比較寬,能以較強(qiáng)的穩(wěn)健性進(jìn)行差異懸殊的樣品間定量比較。
而在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上,在高脂飲食下,帕金森病DJ-1在小鼠腦組織及人腦脊液中的各修飾異構(gòu)體的表達(dá)量變化。揭示出DJ-1的某些異構(gòu)體峰在高脂飲食下與對(duì)照組存在顯著的差別。因此,這些異構(gòu)體峰可作為潛在的早期臨床診斷、疾病分型或治療評(píng)估指標(biāo)。
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