
結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群引起的慢性傳染病,感染身體的不同部位,其中肺部 – 肺結(jié)核(Pulmonary TB)(在結(jié)核案例中占比約70%),其它部位- 肺外結(jié)核(Extra-pulmonary TB)。結(jié)核分枝桿菌是革蘭氏陽(yáng)性菌,但很難被染色,呈棒狀,無(wú)運(yùn)動(dòng)能力;專(zhuān)性需氧, 生長(zhǎng)緩慢,每16~20 小時(shí)分裂一代, 需 4~6 周才能長(zhǎng)成菌落。
我國(guó)的結(jié)核感染率為44.5%,位于世界第二,由于目前沒(méi)有好的診斷試劑盒方法,該病仍然是我國(guó)公共衛(wèi)生的重大威脅。需優(yōu)先篩查的高危人群有醫(yī)護(hù)保健工作者 (HCW) 、軍人、 老年人、學(xué)生 、移民、已患有或疑似患有活動(dòng)性結(jié)核的密接人群、長(zhǎng)期從事護(hù)理工作的人員、免疫功能較弱的人群、囚犯及其他聚居生活人群等。結(jié)核分枝桿菌(MTB)診斷方法很多,主要從微生物學(xué)、造影、分子診斷,免疫學(xué)方法進(jìn)行診斷。
結(jié)核病微生物學(xué)診斷
結(jié)核桿菌檢查是確診肺結(jié)核最特異性的方法,痰中找到結(jié)核菌是確診肺結(jié)核的主要依據(jù)。
涂片法
目前最常用的是涂片法,涂片抗酸染色鏡檢快速簡(jiǎn)便低廉,準(zhǔn)確性較高,在我國(guó)非典型分枝桿菌尚屬少見(jiàn),故抗酸桿菌陽(yáng)性,肺結(jié)核診斷基本即可成立,一般初次就診要查三個(gè)痰標(biāo)本,即夜間痰、清晨痰和即時(shí)痰。在臨床上被廣泛應(yīng)用的方法,該方法無(wú)法區(qū)分死活菌,尤其是無(wú)法區(qū)分結(jié)核分枝桿菌(MTB)和非結(jié)核分枝桿菌(NTM),而且受制于痰液中分枝桿菌數(shù)量,敏感性較低,涂片中分枝桿菌要達(dá)到103-104CFU/mL才可檢測(cè)出陽(yáng)性結(jié)果,所以該方法僅能檢出50%-75%的活動(dòng)性結(jié)核患者,漏檢率很高。除了痰液,尚可采取咽喉部分泌物、胸液、腹水、尿液、腦脊液、胃液、膿液、糞便等標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)。
培養(yǎng)法
痰結(jié)核菌培養(yǎng),痰中查出結(jié)核菌,就能確診患了結(jié)核病。結(jié)果可信度高,并能做結(jié)核菌藥敏試驗(yàn)。它雖然是診斷肺結(jié)核的"金指標(biāo)",但陽(yáng)性率低是美中不足之處。培養(yǎng)法雖然靈敏度增加不少,但檢測(cè)周期太長(zhǎng)(2-8周),不但貽誤治療,也大大增加了患者傳播給別人的機(jī)會(huì)。
結(jié)核分子生物學(xué)診斷
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),特異性較差,優(yōu)點(diǎn)是敏感性可達(dá)98%~100%。
DNA檢測(cè)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)可將標(biāo)本中微量的結(jié)核菌DNA加以擴(kuò)增,但仍有假陽(yáng)性的情況發(fā)生,這是由于DNA樣本提取過(guò)程中遭受污染等技術(shù)原因,并且不能區(qū)分活菌與死菌,故不能用于評(píng)估結(jié)核病的治療效果和流行病學(xué)調(diào)查研究等,僅推薦在非結(jié)核分枝桿菌病高發(fā)地區(qū)圖片抗酸抗菌陽(yáng)性病例中使用,來(lái)快速區(qū)分結(jié)核與非結(jié)核分枝桿菌。
RNA檢測(cè)
在結(jié)核診斷領(lǐng)域,目前談?wù)撦^多的是以RNA為檢測(cè)靶標(biāo)的檢測(cè)技術(shù),由于該方法剛剛興起,被稱(chēng)為下一代分子診斷技術(shù)(NGM)。該方法使用16S rRNA為靶標(biāo)。由于16S rRNA在一個(gè)結(jié)核分枝桿菌里是可達(dá)一萬(wàn)多個(gè),所以其靈敏度很高,16S rRNA又是細(xì)菌分類(lèi)的依據(jù),所以其特異性也極高,是目前市場(chǎng)上唯一可以區(qū)分結(jié)核分枝桿菌(MTB)和非結(jié)核分枝桿菌(NTM)的分子生物學(xué)檢測(cè)方法。
結(jié)核病免疫學(xué)診斷
結(jié)核桿菌IgG抗體檢測(cè)
感染結(jié)核分支桿菌后,體內(nèi)可產(chǎn)生特異性抗體。將結(jié)核分支桿菌抗原包被在固相載體上,與待測(cè)血清反應(yīng),血清中相應(yīng)的抗體可結(jié)合于其上,再以膠體金(或酶)標(biāo)記,顯示反應(yīng),可檢出血清中結(jié)核分支桿菌抗體。結(jié)核桿菌IgG抗體檢測(cè)特異性較好,對(duì)于排除結(jié)核陽(yáng)性有利,但是不能確診活動(dòng)性結(jié)核。
結(jié)核菌素純蛋白衍化物(PPD)試驗(yàn)(TST)
PPD試驗(yàn)陽(yáng)性是感染過(guò)結(jié)核菌的證據(jù)之一。應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)來(lái)測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌是否能引起超敏反應(yīng)。陽(yáng)性表示結(jié)核感染(接種卡介苗或自然感染結(jié)核),但并不一定患病。我國(guó)城市成年居民的結(jié)核感染率在60%以上,故PPD的一般陽(yáng)性結(jié)果意義不大,一般陽(yáng)性?xún)H表示曾感染過(guò)結(jié)核。PPD試驗(yàn)對(duì)嬰幼兒的診斷價(jià)值比成年人大,因?yàn)槟挲g越小,自然感染率越低,活動(dòng)性結(jié)核可能性越大。嬰幼兒尤其是未接種卡介苗者,中度陽(yáng)性多表示體內(nèi)有新的活動(dòng)性病灶。強(qiáng)陽(yáng)性和極強(qiáng)陽(yáng)性者,表明體內(nèi)有活動(dòng)性結(jié)核病。PPD試驗(yàn)由陰轉(zhuǎn)陽(yáng),或反應(yīng)直徑由<10mm增至>10mm,且增幅>6mm,表明新近有感染。
γ干擾素釋放試驗(yàn)(IGRA)
細(xì)胞免疫介導(dǎo)的結(jié)核菌γ干擾素釋放試驗(yàn)(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,)是近年來(lái)采用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISPOT)法定量檢出受檢者全血或外周血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)結(jié)核分枝桿菌特異性抗原的IFN-γ檢測(cè)釋放反應(yīng),用于結(jié)核菌感染的診斷。IFN-γ為T(mén)hl細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子,不但能夠反映機(jī)體結(jié)核的Thl細(xì)胞免疫情況,還與體內(nèi)結(jié)核菌的抗原含量密切相關(guān)。檢測(cè)結(jié)果在血樣采集后12至18小時(shí)得出,報(bào)告結(jié)果分為陽(yáng)性、陰性和不確定。大型臨床研究顯示,在高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)室中不確定結(jié)果的發(fā)生率僅為2%~4%,因此獲得有意義結(jié)果的幾率均超過(guò)96%。IGRA在結(jié)核診斷中的意義正在被越來(lái)越多的臨床實(shí)驗(yàn)所證實(shí),具有多種操作優(yōu)勢(shì):患者無(wú)須返回獲取檢測(cè)結(jié)果,并且實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制幾乎可確保每次均可獲得有意義的結(jié)果。IGRA的主要操作局限為其費(fèi)用遠(yuǎn)高于TST。然而,大部分研究提示,在大型結(jié)核控制項(xiàng)目的背景之下IGRA具有較好的成本效益。因?yàn)榫哂懈呙舾行院透咛禺愋裕⑶也皇芸ń槊绾痛蠖鄶?shù)非致病分枝桿菌的影響,尤其對(duì)于像中國(guó)這樣普遍接種卡介苗的結(jié)核高負(fù)擔(dān)國(guó)家,更具有重要意義。
結(jié)核影像學(xué)診斷
胸部Ⅹ線:檢查不但可以早期發(fā)現(xiàn)結(jié)核病,而且可以確定病灶的部位、性質(zhì)、范圍,了解發(fā)病情況及用于治療效果的判斷,并且開(kāi)展方便,病人樂(lè)于接受。胸部CT可以發(fā)現(xiàn)較小的或隱蔽部位的病變,可以彌補(bǔ)一般Ⅹ線檢查的不足。
纖維支氣管鏡檢查:可以直接觀察或間接判斷支氣管、肺內(nèi)病變,并且有活組織檢查、灌洗、錄像、拍攝氣管內(nèi)照片等功能,對(duì)于診斷和鑒別診斷特別有用。
胸腔鏡和縱隔鏡檢查:均可用于觀察胸腔、縱隔內(nèi)腫大淋巴結(jié),并可取出活組織檢查以利診斷和鑒別診斷。
超聲波檢查:主要用于胸腔積液的診斷和鑒別診斷。
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