
原理:試劑中的心磷脂作為抗原與抗體發(fā)生反應(yīng),卵磷脂可加強心磷脂的抗原性,膽固醇可增強抗體的敏感性。這些成分溶于無水乙醇中,在加入水后,膽固醇析出形成載體,心磷脂和卵磷脂在水中形成膠體狀包裹在其周圍,形成膠體微粒。將此抗原微;鞈矣诩妆桨芳t溶液中,加人待測血清,血清中的抗體與之反應(yīng)后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝集塊。
試劑:試劑組成:TRUST抗原混懸液(抗原為心磷脂的甲苯胺紅溶液)、反應(yīng)紙卡、專用滴管、陽性對照和陰性對照。
操作:按試劑盒所附的使用說明書或?qū)嶒炇抑贫ǖ?SOP 進行操作,主要操作過程如下:設(shè)定和加載陰性對照、陽性對照、質(zhì)控品和待測樣本到反應(yīng)圈內(nèi)→加抗原試劑→混勻反應(yīng)→觀察結(jié)果。如需定量檢測, 可將待測血清用生理鹽水倍比系列稀釋(1:2、1:4、1:8、1:16、1:32),然后按上述定性方法進行試驗。
1.定性試驗:
(1)分別吸取50微升梅毒陽性對照和陰性對照均勻鋪在紙卡的兩個圓圈中。
(2)取待檢血清或血漿50微升(不需滅活)置于紙卡的另一圓圈中。
(3)用專用滴管及針頭垂直分別滴加TRUST試劑1滴于上述血清中。
(4)按每分鐘100轉(zhuǎn)搖動8分鐘,肉眼觀察結(jié)果。
2.定量試驗:
將待檢血清用生理鹽水作倍比稀釋,然后按上述定性方法進行試驗,以呈現(xiàn)明顯凝集反應(yīng)的最高稀釋度作為該血清的凝集效價。
1.陽性反應(yīng)(+++~++++):可見中等或較大的紅色凝集物。
2.弱陽性反應(yīng)(+~++):可見較小的紅色凝集物。
3.陰性反應(yīng)(-):可見均勻的抗原顆粒而無凝集物。
(1)試驗需在室溫(20 ~25℃)中操作。
(2)待測血清須新鮮、無污染,否則可能出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果。
(3)在規(guī)定的時間內(nèi)及時觀察結(jié)果。
(4)本法僅為非特異性血清學(xué)篩查試驗,陰性結(jié)果不能排除梅毒感染,陽性反應(yīng)結(jié)果需進一步做梅毒螺旋體抗體試驗確認。
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