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循環(huán)腫瘤細胞（CTC）作為新型的腫瘤標(biāo)志物，具有無創(chuàng)、動態(tài)監(jiān)測和高準(zhǔn)確度等特點，可以提供精確的腫瘤分子特征，幫助了解腫瘤發(fā)展過程中的變化。因此，CTC在腫瘤進展的動態(tài)監(jiān)測中具有重要臨床價值。

胃腸道惡性腫瘤是最常見的惡性腫瘤之一，我國胃癌的發(fā)病率和死亡率均居惡性腫瘤的第3位；結(jié)直腸癌的發(fā)病率居第2位，死亡率居第5位，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的首要原因，接受根治性手術(shù)的胃腸道惡性腫瘤患者仍有5%~55%的概率在5年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。因此，如何有效監(jiān)測疾病進展并準(zhǔn)確判斷預(yù)后，是胃腸道惡性腫瘤診治難點。

循環(huán)腫瘤細胞（circulatingtumorcell，CTC）作為液體活檢的主要代表，早在1869年就已被發(fā)現(xiàn)存在于腫瘤患者的血液中，是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要原因。CTC作為實體腫瘤脫落進入血液的游離癌細胞，攜帶有腫瘤細胞完整的基因組信息，更具有完整的腫瘤細胞形態(tài)及細胞膜標(biāo)記相較傳統(tǒng)組織學(xué)活檢，CTC具有創(chuàng)傷小和可重復(fù)檢測等優(yōu)勢，可提供關(guān)于胃腸道惡性腫瘤思者疾病狀態(tài)的實時信息。

本共識依據(jù)循證醫(yī)學(xué)證據(jù)質(zhì)量和推薦強度，按照推薦意見分級的評估、制定及評價（Grade of Recommendations Assessment，Development and Evaluation，GRADE）91對證據(jù)質(zhì)量和推薦意見進行分級，證據(jù)質(zhì)量等級分為“A、B、D4級，推薦強度為“強推薦和”弱推薦”。

1 CTC與分子殘留病灶（MRD）的監(jiān)測

分子殘留病灶（molecularresidualdisease，MRD）是指腫瘤經(jīng)過治療之后，傳統(tǒng)影像學(xué)或?qū)嶒炇覚z測不能發(fā)現(xiàn)，但可通過液體活檢手段發(fā)現(xiàn)的腫瘤微小殘留，能更早地提示腫瘤持續(xù)存在和疾病進展。MRD檢測對象包括CTC和循環(huán)腫瘤DNA（circulatingtumorDNA，CtDNA）等，其臨床應(yīng)用逐步從血液腫瘤延伸至實體腫瘤范時，目前在乳腺癌和肺癌中的臨床應(yīng)用已達成部分共識。MRD檢測可提示早期非小細胞肺癌手術(shù)后的復(fù)發(fā)風(fēng)險高低，且有助于晚期肺癌的預(yù)后判斷；早期乳腺癌CTC計數(shù)1個/7.5ml血液，即代表有MRD的存在、或提示較差的預(yù)后。在實際臨床應(yīng)用中，基于少量CTC和ctDNA檢測可在各種惡性腫瘤中進行MRD監(jiān)測，兩者聯(lián)合檢測可有效提升MRD檢測靈敏度。

推薦意見1：  CTC可作為MRD的檢測指標(biāo)對腫瘤殘留微病灶進行監(jiān)測。CTC和循環(huán)腫瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）聯(lián)合檢測可有效提高MRD檢測敏感度。（證據(jù)等級：B，推薦級別：強）

MRD是指腫瘤經(jīng)過治療之后，傳統(tǒng)影像學(xué)或?qū)嶒炇覚z測不能發(fā)現(xiàn)，但可通過液體活檢手段發(fā)現(xiàn)的腫瘤微小殘留，能更早地提示腫瘤持續(xù)存在和疾病進展。MRD檢測對象包括CTC和ctDNA等。

2  CTC檢測技術(shù)

推薦意見2：  CTC檢測技術(shù)主要包括依賴特定標(biāo)志物的生物學(xué)特性分離和不依賴于特定標(biāo)志物的物理特性分離兩大類。不同的分離富集技術(shù)各有優(yōu)缺點。實驗室應(yīng)綜合考慮技術(shù)特點和下游應(yīng)用目的，選擇合適的方法并建立完善的質(zhì)量管理體系。（證據(jù)等級：B，推薦級別：強）

CTC在血液中有多種存在形式，包括不同的分子分型（上皮型E-CTC、間質(zhì)型M-CTC和混合型CTC）和細胞分型「單個CTC.循環(huán)腫瘤微栓Ccirculatingtumormicroemboli，CTM）和CTC-WBC族】，CTC的稀有性和高度異質(zhì)性是CTC分離富集需要克服的技術(shù)難題。CTC與血液中其他細胞有顯著差異，包括其物理特性、免疫學(xué)特性和基因表達等方面，這些構(gòu)成了CTC分離富集的理論基礎(chǔ)。

2.1  物理學(xué)捕獲方法

2.2  免疫學(xué)捕獲方法

3  CTC的臨床應(yīng)用

3.1  腫瘤預(yù)后的判斷

推薦意見3：  CTC狀態(tài)與臨床因素如腫瘤浸潤和腫瘤TNM分期等具有相關(guān)性。胃腸道腫瘤患者中CTC陽性者較CTC陰性者預(yù)后更差，其中單個CTC、CTM和中性粒細胞CTM的存在分別代表依次遞增的風(fēng)險級別。CTC檢測有助于臨床判斷預(yù)后和制定進一步的治療策略。（證據(jù)等級：A，推薦級別：強）

3.1.1  胃癌

3.1.2  結(jié)直腸癌

3.2  腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的監(jiān)測

推薦意見4：  接受根治性手術(shù)治療的胃腸道腫瘤患者術(shù)前或術(shù)后CTC陽性較CTC陰性提示更高的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險，需對其進行密切隨訪管理，建議每3~6個月進行1次CTC檢測。（證據(jù)等級：A，推薦級別：強）

3.2.1  胃癌

3.2.2  結(jié)直腸癌

3.3  早期腫瘤的療效監(jiān)測

推薦意見5：  接受新輔助治療和術(shù)后輔助治療的胃腸道腫瘤患者可通過新輔助治療和輔助治療前后CTC的狀態(tài)分析治療效果。CTC水平明顯降低提示療效較好；反之提示療效未達預(yù)期，應(yīng)及時考慮調(diào)整治療方案。CTC陽性提示更高的疾病進展風(fēng)險，需對其進行密切隨訪管理，建議每2個治療周期進行1次CTC檢測。（證據(jù)等級：A，推薦級別：強）

3.3.1  胃癌

3.3.2  結(jié)直腸癌

3.4  轉(zhuǎn)移性腫瘤的療效監(jiān)測

推薦意見6：  轉(zhuǎn)移性胃腸道腫瘤患者在接受放化療、靶向治療或免疫治療等全身綜合治療過程中，監(jiān)測CTC計數(shù)動態(tài)變化可及時提示腫瘤進展?fàn)顟B(tài)，有效評估治療療效。CTC計數(shù)增加說明治療無效，需要變更治療方案；若CTC計數(shù)明顯降低，說明治療有效。對患者動態(tài)監(jiān)測CTC計數(shù)時，建議在治療前可先行1次CTC檢測，治療1個周期后再次進行CTC檢測。（證據(jù)等級：A，推薦級別：強）

3.4.1  胃癌

3.4.2  結(jié)直腸癌

3.5  腫瘤的輔助診斷

推薦意見7：  CTC聯(lián)合影像學(xué)、病理學(xué)和血清腫瘤標(biāo)志物檢查可對胃腸道腫瘤患者進行更精準(zhǔn)的輔助診斷。隨訪期間建議每6~12個月進行1次CTC檢測，實時監(jiān)測腫瘤進展風(fēng)險。（證據(jù)等級：B，推薦級別：強）

3.5.1  胃癌

3.5.2  結(jié)直腸癌

附：CTC檢測流程

1、樣本采集

外周血采集需由專業(yè)醫(yī)護人員進行。使用BDVacutainerK2（EDTA）的6mL抗凝真空采血管采集5mL外周血，上下輕柔混勻8次，1h內(nèi)上機檢測若需遠途運輸，將其豎直保存于4~8℃環(huán)境，避免副烈搖晃，上機前需置于室溫復(fù)溫20min。

2、CTC分離

樣本上機處理參照CTC-BIOPSY系統(tǒng)（武漢友芝友醫(yī)療科技股份有限公司）標(biāo)準(zhǔn)上機步驟，樣本分離后可用于后續(xù)檢測

3、染色閱片

樣本分離完成后用甲醇固定，然后進行瑞氏吉姆薩染液染色，接著將染色完成的樣本進行封固。使用普通光學(xué)顯微鏡，通過細胞病理形態(tài)閱片來鑒定不同CTC細胞類型。

4  CTC鑒定

CTC鑒定的6條標(biāo)準(zhǔn)：（1）細胞核異型性，非中性粒細胞（桿狀或分葉）形態(tài)，非單核細胞（馬蹄形、腎形或卵圓形）形態(tài)；（2）核質(zhì)比>0.8；（3）細胞直徑>15um；（4）核深染且著色不均勻；（5）核膜增厚出現(xiàn)凹陷或皺福，核膜呈鋸齒狀；（6）細胞核染色質(zhì)邊移、巨大核仁或異常分裂。符合=4個以上評判標(biāo)準(zhǔn)，或滿足評判標(biāo)準(zhǔn)（6）外加符合其他2個條件可判讀為CTC。=3個CTC形成的細胞團鑒定為CTM；=3個CTC形成的細胞團中包含有中性粒細胞則鑒定為中性粒細胞CTM。臨床報告結(jié)果包括CTC總計數(shù)和3種不同CTC細胞分型（單個CTC、CTM及中性粒細胞CTM，圖1）。

來源：《實用腫瘤雜志》2023年第6期、朱明恕最新指南分享