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標(biāo)準(zhǔn)化中發(fā)現(xiàn)的問題

上周談到為了克服凍干對(duì)CRP的影響，專門將一半制備制品分裝于安瓿，深低溫保存。其代號(hào)為：ERM-DA472。其中含有的β2M正在研究中，未給予定值。但是在ERM-DA470k制品中，還有銅藍(lán)蛋白（CER）未被定值。原因是什么？

在候選的參考物質(zhì)和它們對(duì)參考物質(zhì)互換性中，因在候選參考物質(zhì)中的銅藍(lán)蛋白存在了非典型異構(gòu)體導(dǎo)致了陰性影響。在為ERM-DA470k/IFCC確定特性時(shí)，相對(duì)于ERM-DA470/IFCC校準(zhǔn)時(shí),有兩組常規(guī)方法，它們的CER結(jié)果差異約10%。在這兩組常規(guī)方法間有著相同大小和方向的差異，在EQAS計(jì)劃中也觀察到該差異。但是，在研究中包括的所有常規(guī)方法，均相對(duì)于ERM-DA470/IFCC校準(zhǔn)的。

以CRM470校準(zhǔn)后，檢測ERM-DA470k內(nèi)銅藍(lán)蛋白的表現(xiàn)

問題究竟是什么？

隨著人們對(duì)臨床關(guān)注的這些蛋白生物標(biāo)志物深入研究，較之以往有了非常大的進(jìn)步。幾乎所有這些蛋白的每一個(gè)，都簡直是一個(gè)大家族！不對(duì)蛋白的每個(gè)家族有完全深入的了解，是無法實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化的。另外，進(jìn)行參考物質(zhì)和參考方法研究的上層科學(xué)家，如果只從參考層次上去建立參考系列，而不考慮常規(guī)檢驗(yàn)的方法具有的情況，要實(shí)現(xiàn)溯源性或正確度的傳遞都是空話！

非均相蛋白包括了陽離子/陰離子、蛋白（～2000）、酶、糖基化、脂類等，是一種復(fù)合混合物。這些化合物還涉及：結(jié)合、失活、蛋白水解、大結(jié)構(gòu)等。

蛋白的生物標(biāo)志物，其項(xiàng)目或被稱為“分析物”的對(duì)象，并不是以往想象的單一分子結(jié)構(gòu)（如無機(jī)鹽氯化鈉）。它們?cè)跇悠分写嬖诘臓顟B(tài)，因被解離、修飾（糖基化、氧化、脫酰胺、磷酸化等）、二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)、多聚體表現(xiàn)、凝聚程度等，使各個(gè)被檢測的蛋白生物標(biāo)志物實(shí)際上是具有“相同”名稱的許多類似結(jié)構(gòu)分子復(fù)合體。因此，不同廠商使用的抗體對(duì)于抗原決定簇專一性不同，相同樣品的檢測結(jié)果就會(huì)不同。•結(jié)論：被測量的定義不明確。使檢測結(jié)果缺少可比性的根本原因。

我的認(rèn)識(shí)

免疫測定方法標(biāo)準(zhǔn)化不簡單。今天，我們要注意“被測量”詞語。必須清楚：實(shí)驗(yàn)室使用的某個(gè)免疫測定試劑，它究竟測定的是該項(xiàng)目名稱下的哪一個(gè)真正的被測量！hCG標(biāo)準(zhǔn)化很完美。但是，在臨床和臨床實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)習(xí)慣的以IU/L表示的結(jié)果，現(xiàn)在要改為mol/L，至今還不適應(yīng)和不理解。只有真正的去學(xué)習(xí)和深入了解，才能使實(shí)現(xiàn)的hCG標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)揮作用。

我關(guān)注cTnI標(biāo)準(zhǔn)化已經(jīng)多年，我正在期待真的哪天宣布實(shí)現(xiàn)了。可是，若真如Fred Apple看到的，問題變得非常復(fù)雜。無論如何，臨床實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化一定要走下去，因?yàn)槲覀兊臋z測結(jié)果是為病人的正確診斷、治療、和監(jiān)視服務(wù)的。