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曲霉是廣泛分布于自然界的一類絲狀真菌，多存在于土壤、腐敗有機物、糧食和飼料中，甚至在正常的人體皮膚和粘膜表面也會有曲霉存在。曲霉種類很多，達900余種，大多數(shù)曲霉只發(fā)現(xiàn)了無性階段，歸屬于半知菌亞門、半知菌綱、念珠菌目、念珠菌科、曲霉菌屬，少數(shù)菌種具有有性階段，歸屬于子囊菌門、不整子囊菌綱、散囊菌目、散囊菌科、散囊菌屬、裸胞殼屬和薩托菌屬。
　　曲霉是一種條件致病菌，人體對曲霉有極強免疫力，只有在人體免疫功能降低時才能致病，曲霉可侵犯機體許多部位，尤其是呼吸系統(tǒng)為主，除此之外還可感染眼部、外耳道、皮膚等部位。除直接感染和變態(tài)反應引起曲霉病外，曲霉可產(chǎn)生毒素引起食物中毒，有些曲霉毒素還具有致癌作用，如黃曲霉素、雜色曲霉素。
　　一、曲霉致病性
　　曲霉感染是一種免疫相關性疾病，吸入曲霉孢子導致疾病是常見的感染途徑，曲霉感染主要包括3種形式：侵襲性曲霉病、慢性曲霉病、過敏性曲霉病。
　　侵襲性曲霉病多發(fā)生在免疫缺陷患者中，是一種較為嚴重的深部真菌感染性疾病。引起侵襲性曲霉病的致病菌主要包括煙曲霉、黃曲霉、黑曲霉和土曲霉。近年來，隨著免疫抑制劑、廣譜抗菌藥的廣泛使用，器官移植等侵入性診療技術的普遍開展，以及惡性腫瘤、獲得性免疫缺陷綜合征患者人數(shù)的不斷增加，侵襲性曲霉病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。侵襲性曲霉病在常見的醫(yī)院獲得性真菌感染中排名第2位，僅次于侵襲性念珠病，其預后往往較差，死亡率高達50%以上，曲霉感染后是否發(fā)病及病情輕重與宿主的基礎疾病和免疫功能密切相關。
　　慢性曲霉病一般指慢性肺曲霉病，是一種復雜且無臨床特異性病癥的肺部疾病，常伴有肺結核感染、非結核分枝桿菌感染、結節(jié)或肺癌手術等，因此易造成誤診、漏診，導致發(fā)病率較高。慢性肺曲霉病主要由煙曲霉引起，是以肺實質(zhì)緩慢進行性破壞為特征的疾病，其形式表現(xiàn)為單發(fā)或多發(fā)空洞、結節(jié)、浸潤或纖維化，伴或不伴曲霉菌球。
　　過敏性曲霉病以過敏性支氣管肺曲霉病為代表，其致病曲霉以煙曲霉最常見，黃曲霉、稻曲霉、土曲霉偶可見到。過敏性支氣管肺曲霉病較常發(fā)生于哮喘患者，與其他過敏性疾病常見于兒童不同，其發(fā)病率在成年人最高。由于臨床對該病認識不足，常會被漏診，往往發(fā)展至疾病晚期出現(xiàn)不可逆結構改變才被確診。
　　二、曲霉檢測方法
　　近年來，隨著曲霉病診療技術的發(fā)展，抗真菌藥物和輔助藥物為臨床治療曲霉病提供了有力的武器。然而，由于曲霉病患者往往同時患有其他疾病或者不具有特異性病癥，因此難以早期得到診斷而延誤病情。由此可見，曲霉感染的快速、精確檢測十分必要。
　　曲霉的實驗室檢測方法主要有：顯微鏡檢查、分離培養(yǎng)與鑒定、血清學抗原抗體檢測、聚合酶鏈反應（PCR）等，各檢測方法特異性、靈敏度及檢測條件不同，具有不同優(yōu)缺點，對臨床診斷曲霉感染具有不同意義。
　　組織病理學和無菌部位的真菌培養(yǎng)被認為是診斷曲霉病的金標準。但是這類傳統(tǒng)實驗室診斷方法操作繁瑣，耗時長，對試驗操作技術和樣本取材有著較高要求，陽性率低，而且缺乏敏感性和特異性的問題。
　　半乳甘露聚糖是曲霉細胞壁的組成成分，當曲霉感染時，血液和體液中的半乳甘露聚糖會顯著增高，故檢測半乳甘露聚糖可用于曲霉感染的早期診斷。2016年美國感染病學會《曲霉菌病診治指南》推薦，對于血液系統(tǒng)惡性腫瘤及造血干細胞移植患者，建議將血清和肺泡灌洗液中的半乳甘露聚糖作為侵襲性曲霉病的精確診斷標志物。
　　針對曲霉菌特異性IgE或總IgE的檢測可作為過敏性曲霉菌病的診斷指標，治療過程中還可動態(tài)監(jiān)測總IgE水平用以指導藥物調(diào)整。煙曲霉血清沉淀素或特異性IgG對過敏性支氣管肺曲霉病的診斷特異性不高，但如果患者出現(xiàn)高滴度的曲霉特異性IgG抗體，同時伴有胸膜纖維化或持續(xù)性肺部空洞形成，則提示為慢性肺曲霉病。
　　近年來分子生物學技術發(fā)展迅速，PCR擴增技術在臨床上已應用于各種病原的檢測，該技術靈敏度高，特異性好，具有良好的臨床應用前景，尤其在曲霉早期感染的診斷方面具有優(yōu)勢。在曲霉檢測方面，2016年美國感染病學會《曲霉菌病診治指南》推薦有條件的實驗室開展分子生物學檢測用于曲霉病診斷，但由于該方法尚缺乏結論性驗證證據(jù)，因此應結合其他診斷結果和臨床表現(xiàn)進行綜合性判斷。
　　三、已批準曲霉檢測試劑概況
　　我國境內(nèi)已批準曲霉檢測試劑主要為過敏原特異性IgE抗體檢測試劑和曲霉抗原/抗體檢測試劑，前者管理類別為II類，后者管理類別為三類，均使用血清樣本進行檢測。已批準曲霉檢測試劑以酶聯(lián)免疫法居多，其具有敏感性高、特異性強，操作簡便，肉眼可觀察，既可以檢測抗體、又可以檢測抗原，易于自動化，便于大規(guī)模檢測等優(yōu)點。但酶聯(lián)免疫法受其技術原理的影響，干擾因素較多，容易出現(xiàn)假陽性或假陰性。目前，已有基于熒光PCR法的國產(chǎn)曲霉核酸檢測試劑獲批上市，該方法使用痰液樣本，具有靈敏度高和特異性高的特點，在曲霉感染早期臨床檢測方面具有優(yōu)勢。

　　四、總結
　　曲霉在免疫缺陷患者中往往引起較為嚴重的感染，其預后較差，死亡率較高，因此對曲霉的檢測，尤其是感染早期的檢測，在治療曲霉感染方面具有重要意義。隨著分子診斷技術的發(fā)展以及PCR實驗室的建立，曲霉核酸檢測在臨床應用方面的優(yōu)勢得以凸顯。但是目前曲霉核酸檢測類產(chǎn)品普遍存在以下問題：曲霉核酸檢測的診斷標準尚不明確，注冊申請人對產(chǎn)品性能驗證的方法、內(nèi)容多種多樣，有的存在方法不合理，驗證內(nèi)容不全面等問題，對交叉反應和包容性的驗證需要進一步規(guī)范，各個注冊申請人對陽性判斷值的建立方法理解差異較大，對于臨床判斷曲霉病的金標準認識不統(tǒng)一，對于最低檢出能力的評價也存在不同的認識，不同注冊申請人的企業(yè)參考品設置也是千差萬別，為了進一步規(guī)范此類產(chǎn)品的申報材料，統(tǒng)一注冊申請人的認識，為審評人員提供依據(jù)，接下來需制定相關原則對曲霉核酸檢測試劑開發(fā)進行指導。

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