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過氧化物酶染色
（peroxidase stain,POX)

正常值

細(xì)胞質(zhì)中有藍(lán)黑色顆粒者為陽性。

過氧化物酶主要存在于粒細(xì)胞中，除早期粒細(xì)胞外，其余各階段均呈陽性反應(yīng)，細(xì)胞越成熟，POX陽性程度越強(qiáng)。單核細(xì)胞從幼單核細(xì)胞起呈彌散細(xì)顆粒狀弱陽性。各階段淋巴細(xì)胞、巨核細(xì)胞、紅細(xì)胞等均呈陰性。

影響因素

1.標(biāo)本要求新鮮，放置過久細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶易消失。

2.溶血的標(biāo)本易使背景產(chǎn)生許多難以去除的雜質(zhì)顆粒。

3.標(biāo)本在未染色前不能沾甲醇和氧化劑類試劑，以免細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶被抑制和破壞。

4.過氧化物酶反應(yīng)的最佳pH一般在6. 5左右，若將試劑應(yīng)用液控制在此pH，則染色效果較佳。

5.過氧化氫液體的濃度過高會抑制酶作用，過低則失去應(yīng)起的作用，使陽性程度減弱。過氧化氫的濃度以將其滴在血膜上產(chǎn)生微小氣泡為準(zhǔn)。

6.每次染色均應(yīng)設(shè)陰性和陽性標(biāo)本對照，如有疑問，則需要復(fù)測。

臨床解讀

過氧化物酶染色主要用于鑒別白血病的類型：急性粒細(xì)胞白血病多呈陽性，急性單核細(xì)胞白血病多呈弱陽性，急性淋巴細(xì)胞白血病則呈陰性。通常將POX染色陽性率3%作為淋巴細(xì)胞與非淋巴細(xì)胞的分界標(biāo)準(zhǔn)，小原粒細(xì)胞白血病與急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞在形態(tài)上很難鑒別，前者POX陽性率常＞10%，后者＜3%。異常組織細(xì)胞和單核細(xì)胞，前者呈POX染色陰性。

蘇丹黑B染色
圖片
（sudan black B stain,SB)

正常值

陽性產(chǎn)物為黑色或藍(lán)黑色顆粒定位于細(xì)胞質(zhì)中。

粒細(xì)胞除原粒細(xì)胞外，均可見陽性顆粒，嗜酸性粒細(xì)胞呈泡狀陽性；單核細(xì)胞大多呈弱陽性反應(yīng)，其顆粒細(xì)小，散在分布；淋巴細(xì)胞、幼紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞和血小板呈陰性反應(yīng)。

影響因素

1.蘇丹黑B儲存液配好后，染料充分溶解后再用。

2.蘇丹黑B儲存液為無水乙醇所配，易揮發(fā)，所以容器封閉性能要好，并置4℃冰箱保存。

3.蘇丹黑B染色液可用1~2個月，如發(fā)生沉淀、由藍(lán)色變?yōu)楹稚�，則不宜再用。

4.緩沖液在臨用前應(yīng)混勻，對結(jié)果方能無影響。

5.避免部分脂肪溶解，涂片在染色前勿沾上丙酮、乙醚、氯仿等溶劑。

臨床解讀

SB染色與POX結(jié)果相似，但SB較POX更敏感，SB染色主要應(yīng)用各種急性白血病的鑒別。急性粒細(xì)胞白血病原粒細(xì)胞呈陰性反應(yīng)，少數(shù)陽性：早幼粒細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。急性淋巴細(xì)胞白血病各期淋巴細(xì)胞均為陰性。急性單核細(xì)胞白血病的原單核細(xì)胞為陰性，少數(shù)為少而細(xì)小的陽性。再生障礙性貧血時成熟中性粒細(xì)胞的陽性程度增高；慢性粒細(xì)胞白血病、霍奇金病、惡性貧血可見陽性減弱；戈謝細(xì)胞呈弱陽性；尼曼－匹克細(xì)胞呈中等陽性。再生障礙性貧血時陽性增多。

中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色
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（neutrophil alkaline posphatase stain,NAP)

正常值

中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶積分參考范圍：Kaplow法35~100分。陽性結(jié)果為胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)灰褐色至深黑色顆粒狀或片狀沉淀。各實(shí)驗(yàn)室條件不同，參考值有差異，應(yīng)建立自己的實(shí)驗(yàn)室參考值。

影響因素

1.標(biāo)本要求新鮮，標(biāo)本放置過久酶活性降低。

2.固定液以10%甲醛甲醇固定液為好。

3.基質(zhì)液必須新鮮配制，pH以9. 5為宜，pH<9時酶活力下降，pH>10時細(xì)胞易破碎，酶擴(kuò)散，造成假陰性。

4.環(huán)境條件可干擾本試驗(yàn)，每次染色均應(yīng)設(shè)陰性、陽性對照。

臨床解讀

1.生理變化

NAP活性受腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素影響較大，因此新生兒NAP活性較高，以后逐漸下降；妊娠和月經(jīng)周期的變化可使NAP的活力有所差異；應(yīng)激狀態(tài)下（緊張、恐懼、激烈運(yùn)動等）NAP積分可增高。

2.病理變化

（1）嚴(yán)重的化膿性感染，球菌性感染較桿菌性感染高；燒傷、中毒、手術(shù)后、外傷等均可使NAP活力升高。

（2）鑒別白血病類型：慢性粒細(xì)胞白血病與類白血病反應(yīng)，前者NAP活性降低，后者升高；急性粒細(xì)胞白血病NAP活性降低，而急性淋巴細(xì)胞白血病NAP活力增高；再生障礙性貧血NAP活力持續(xù)增加，而陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿降低；真性紅細(xì)胞增多癥NAP活力持續(xù)增加，而繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥NAP積分正�；蚪档�；惡性組織細(xì)胞白血病NAP積分明顯減低，而反應(yīng)性組織細(xì)胞增多時NAP積分往往增高。

過碘酸－雪夫反應(yīng)
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（periodic acid schiff reaction,PAS)

正常值

糖原在細(xì)胞質(zhì)中為紅色或紫紅色，呈彌散狀、顆粒狀或塊狀。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)無色或無顆粒為陰性。

1.粒細(xì)胞系統(tǒng)  原粒細(xì)胞呈陰性，自早幼粒細(xì)胞以后隨細(xì)胞成熟陽性反應(yīng)逐漸增強(qiáng)，中性分葉核粒細(xì)胞最強(qiáng)。嗜堿性粒細(xì)胞呈陽性，嗜酸性粒細(xì)胞顆粒不著色，但顆粒間的細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)紅色。

2.單核細(xì)胞系  可見細(xì)胞質(zhì)內(nèi)呈彌散伴細(xì)小顆粒狀紅色陽性。

3.淋巴細(xì)胞系  T細(xì)胞僅一小部分可呈粗顆粒和小塊狀陽性，但B細(xì)胞絕大部分呈陽性反應(yīng)。

4.紅細(xì)胞系  正常人紅細(xì)胞系的各個階段皆呈陰性反應(yīng)，病理性幼紅細(xì)胞為陽性。

5.巨核細(xì)胞  呈陽性。

6.巨噬細(xì)胞  可呈陽性反應(yīng)，漿細(xì)胞呈陰性反應(yīng)。

影響因素

（1）Schiff染液變紅不能再用。

（2）標(biāo)本和使用器材應(yīng)避免帶醛基和還原基團(tuán)的物質(zhì)污染，以免出現(xiàn)假陽性。

（3）品紅質(zhì)量要求嚴(yán)格，若品紅質(zhì)量不佳，多加活性炭紅色也不能被吸收。

（4）過碘酸易潮解，若潮解則氧化效果明顯下降。

（5）涂片經(jīng)過碘酸氧化水洗后，必須底部干燥后方可置入品紅液中，胞間隙中的殘留水分導(dǎo)致整張涂片呈鮮紅色，影響結(jié)果觀察。

（6）染色后的標(biāo)本不能久置，8d后逐漸退色，應(yīng)及時觀察結(jié)果。

（7）染色時間和溫度應(yīng)相對恒定。

臨床解讀

PAS染色主要用于血液病的鑒別診斷。

1.紅細(xì)胞系血液病

紅血病和紅白血病及部分重型珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血等疾病中可呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，其他類型的貧血如巨幼細(xì)胞貧血、再生障礙性貧血為陰性反應(yīng)。

2.白細(xì)胞系血液病

急性粒細(xì)胞白血病呈陰性或弱陽性反應(yīng)，急性單核細(xì)胞白血病呈陽性反應(yīng)，顆粒小而多，彌散分布，胞質(zhì)邊緣偽足處顆粒明顯。淋巴系統(tǒng)惡性增生性疾病如淋巴瘤、霍奇金病，急、慢性淋巴細(xì)胞白血病等淋巴細(xì)胞PAS積分明顯增加。

3.鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞

前者呈粗大紫紅色顆粒或塊陽性，后者弱陽性或陰性。

4.用于戈謝細(xì)胞與尼曼－匹克細(xì)胞的鑒別

前者多呈強(qiáng)陽性，后者呈陰性或弱陽性；用于瑞－斯（Reed-Sternberg)細(xì)胞和巨核細(xì)胞的鑒別、骨髓轉(zhuǎn)移腺癌細(xì)胞與白血病細(xì)胞的鑒別。