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酸性磷酸酶染色

（acid phosphatase stain,ACP）

正常值

細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)紫紅色顆粒為陽(yáng)性。

正常粒細(xì)胞除原粒陰性外，其余各階段呈弱至中度陽(yáng)性，單核細(xì)胞為弱至強(qiáng)陽(yáng)性，紅系為陰性，淋巴細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性，漿細(xì)胞和巨核細(xì)胞可呈中度陽(yáng)性，網(wǎng)狀細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、組織嗜堿性細(xì)胞可呈陽(yáng)性。

影響因素

1. 血液細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶的反應(yīng)最佳pH為4. 5~5. 5，由于方法不同，工作液的配置須用酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定，以免陽(yáng)性強(qiáng)度受影響，甚至無(wú)陽(yáng)性出現(xiàn)。

2. ACP染色結(jié)果以彌散狀陽(yáng)性出現(xiàn)的細(xì)胞較多。如為弱陽(yáng)性反應(yīng)，在復(fù)染時(shí)應(yīng)注意在涂片縱向復(fù)染一半，另一半不復(fù)染，以利弱陽(yáng)性的觀察。

臨床解讀

1. 幫助診斷毛細(xì)胞性白血病

毛細(xì)胞性白血病可呈較強(qiáng)的陽(yáng)性反應(yīng)，且不被L-酒石酸所抑制，淋巴瘤細(xì)胞和慢性淋巴細(xì)胞白血病淋巴細(xì)胞ACP染色也呈陽(yáng)性反應(yīng)，但被L-酒石酸所抑制。

2. 鑒別T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞

前者呈陽(yáng)性反應(yīng)，后者陰性。

3. 鑒別細(xì)胞

鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼－匹克細(xì)胞，前者強(qiáng)陽(yáng)性，后者陰性。鑒別漿細(xì)胞、多發(fā)性骨髓瘤與異常淋巴細(xì)胞，前者呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性，后者呈陰性。

鐵粒染色

（iron granules staining）

正常值

骨髓鐵可染成藍(lán)色顆粒、小珠及小塊。

細(xì)胞外鐵正常為（十）～（十十）。

細(xì)胞內(nèi)鐵正常陽(yáng)性率為0. 12~0. 44，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)常見(jiàn)1~5個(gè)鐵染色顆粒。

影響因素

（1）標(biāo)本取材要滿意。外鐵檢查要選擇含有骨髓小粒的涂片。

（2）所用玻片一定要清潔無(wú)污，需經(jīng)無(wú)鐵處理，除去載玻片上可能存在的污染鐵，此點(diǎn)對(duì)外鐵檢測(cè)特別重要。

（3）試劑要新鮮配置，濃鹽酸與亞鐵氰化鉀的比例要準(zhǔn)確。

（4）最好用放骨髓液的原片做鐵染色，觀察時(shí)要仔細(xì)。

（5）細(xì)胞內(nèi)鐵計(jì)算積分時(shí)以中晚幼紅為準(zhǔn)，原紅和早幼紅不計(jì)入百分比內(nèi)。

臨床解讀

1. 診斷缺鐵性貧血

細(xì)胞外鐵減低或消失，細(xì)胞內(nèi)鐵在缺鐵早期不減少或輕度減少，重癥貧血時(shí)，內(nèi)鐵明顯減少甚至為陰性。經(jīng)鐵劑治療有效后，外鐵迅速增加。

2. 診斷鐵粒幼細(xì)胞性貧血

出現(xiàn)環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞量增多，常＞15%,細(xì)胞外鐵增多。

3. 非缺鐵性貧血

臨床常見(jiàn)的有，溶血性貧血、巨幼細(xì)胞貧血、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、白血病等，均可引起細(xì)胞內(nèi)外鐵的增多。感染、肝硬化、慢性腎炎、尿毒癥及多次輸血者骨髓外鐵增加。

氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色

（naphthol-AS-D chloracetateesterase stain, AS-DCE）

正常值

陽(yáng)性反應(yīng)為細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)紅寶石色顆粒。中性粒細(xì)胞（除原粒細(xì)胞外）可呈陽(yáng)性反應(yīng)，但酶活性并不隨細(xì)胞成熟而增強(qiáng)。嗜酸性和嗜堿性粒細(xì)胞為陰性，嗜堿性細(xì)胞偶可呈弱陽(yáng)性。肥大細(xì)胞有時(shí)可呈陽(yáng)性反應(yīng)。巨核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、幼紅細(xì)胞、血小板為陰性。

影響因素

（1）標(biāo)本必須新鮮，取材后如無(wú)法及時(shí)染色可先行固定。

（2）氯化醋酸萘酚酯酶（NCE）最佳反應(yīng)pH為7. 0~7. 6。

（3）嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，若溫度升高和pH增加可導(dǎo)致氯化醋酸萘酚水解，從而在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生明顯的非特異性酯酶反應(yīng)。

臨床解讀

1. 用于鑒別急性白血病類型

急性粒細(xì)胞白血病大多呈陽(yáng)性反應(yīng)，急性單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞白血病時(shí)呈陰性，急性粒－單細(xì)胞白血病部分（原粒和早幼粒細(xì)胞）呈陽(yáng)性，部分（原單核細(xì)胞和幼單核細(xì)胞）呈陰性。

2. 鑒別嗜堿性粒細(xì)胞與肥大細(xì)胞

前者陰性，后者陽(yáng)性。

非特異性酯酶染色

（nonspecific esterase stain）

常用非特異性酯酶有α-乙酸萘酚酯酶（α-naphtholacetateesterase, α-NAE）、醋酸AS-D萘酚酯酶（naphtholAS-Dacetateesterase,AS-DAE）、α-丁酸萘酚酯酶（α-naphthol butyrase esterase, α-NBE）等。

正常值

細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性。在單核細(xì)胞、吞噬細(xì)胞中此類酶的含量較多且多數(shù)受到氟化鈉（NaF）抑制；粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、部分幼紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞和血小板等呈陰性，如有陽(yáng)性，則不被NaF抑制。

影響因素

1. 酶的活性隨標(biāo)本采集后的時(shí)間而逐漸下降，應(yīng)取材2d內(nèi)染色。

2. α-NAE最佳反應(yīng)pH為6. 0~6. 3。

3. 染色時(shí)間和溫度要相對(duì)恒定。

4. 各種基質(zhì)試劑由于其產(chǎn)品衍生物較多，染色效果可隨產(chǎn)地、生產(chǎn)廠商及批號(hào)不同等因素相差甚遠(yuǎn)，所以每次操作應(yīng)設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照。

5. 在酯酶染色反應(yīng)中切忌基質(zhì)濃度過(guò)高，以防引起背景污染，沖洗困難，特別在冬天，易使涂片表面產(chǎn)生脂質(zhì)沉淀，影響結(jié)果觀察。

臨床解讀

1. 非特異性酯酶又稱單核細(xì)胞酯酶，主要存在于單核細(xì)胞和組織細(xì)胞內(nèi)，正常單核細(xì)胞各階段均呈陽(yáng)性，且可被氟化鈉抑制。

2. 急性粒細(xì)胞白血病可呈陽(yáng)性或弱陽(yáng)性，急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性，但不被氟化鈉抑制。

3. 急性淋巴細(xì)胞白血病一般為陰性。