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關(guān)于出凝血樣本的離心時間和速度，是一個經(jīng)常被討論，但亦可能會被忽視的問題。為什么要離心？一是分離血漿；二是獲得乏血小板血漿。

這里就提到了凝血體外檢測用到的標(biāo)本要求了，我翻了翻試劑說明書，感興趣的同學(xué)也可以自行查閱：

APTT：【樣本要求】取 9 體積新鮮靜脈血與 1 體積枸櫞酸三鈉混合，充分抗凝。參照 NCCLS 文 H21-A3 項(xiàng)下關(guān)于樣本收集、處理與存儲說明。

PTRP：【標(biāo)本處理】室溫下，1,500 g 離心不少于 15 min，分離獲得乏血小板血漿（血小板計(jì)數(shù) < 10×10^9）待檢。

TT：【標(biāo)本處理】室溫下，1,500 g 離心不少于 15 min，分離獲得乏血小板血漿（血小板計(jì)數(shù) < 10×10^9）待檢。

FIB-C：【樣本要求】取 9 體積新鮮靜脈血與 1 體積枸櫞酸三鈉混合，充分抗凝。參照 NCCLS 文 H21-A3 項(xiàng)下關(guān)于樣本收集、處理與存儲說明。

H21-A3 是 1998 年版本，2003 年更新了 A4，舊版本規(guī)定血小板計(jì)數(shù)小于 10×10^9/L 的血漿可以用于常規(guī)血凝試驗(yàn)（APTT、用于非肝素化病人的 PT/INR 和凝血酶時間）；

新版本 H4 規(guī)定：血小板計(jì)數(shù)大于 10×10^9/L 的血漿可能并不適合另外一些凝集試驗(yàn)（如狼瘡抗凝、磷脂抗體和肝素監(jiān)控試驗(yàn)等）。

細(xì)心的同學(xué)發(fā)現(xiàn)了，上面的要求都提到了血小板計(jì)數(shù)，是不是搞懂了這個就明白了離心時間呢？

知彼知己，方可胸有成竹，經(jīng)過了 NCCLS 標(biāo)準(zhǔn)的不斷普及，咱們自己也根據(jù)實(shí)際情況有了自己的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)程。

衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS/T 359-2011 文件，6.1 標(biāo)本的準(zhǔn)備中有寫：在分離血漿時，將裝有標(biāo)本的帶蓋試管在規(guī)定的速度和時間條件下 (室溫、1500 g、不少于 15 min) 離心，以得到乏血小板血漿 (血小板計(jì)數(shù) (<10×10^9/L)。離心機(jī)應(yīng)使用甩平式轉(zhuǎn)頭以減少血漿和血小板的重新混合。

在《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第 4 版），第四章第一節(jié)《血栓與止血檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和處理》描述：「缺乏血小板的血漿（PPP）可用于大多數(shù)的凝血試驗(yàn)，制備必須在大于或等于每分鐘 3000 轉(zhuǎn)條件下離心 15 分鐘。」

第四章第五節(jié)《凝血因子的檢驗(yàn)》中對 APTT 的試劑器材要求：「以 109 mmol/L 枸櫞酸鈉溶液作 1:9 抗凝，3000 r/min 離心 10 分鐘，獲貧含血小板血漿，應(yīng)使用塑料試管，防止血小板激活�！�

統(tǒng)一要求了！看來這制約離心時間得到血漿的阻礙者就是血小板了！

其實(shí)了解了凝血過程下各凝血因子的途徑就好明白為什么要使用乏血小板血漿了，都因?yàn)榱字��?/span>

我們使用的血凝試劑如 APTT，PT 成分便有合成磷脂，通過血漿和體外磷脂孵育，在激活劑和 Ca 離子觸發(fā)下，進(jìn)行凝血過程。

而血小板上有磷脂，要消除；活化的血小板還會釋放綜合肝素的血小板 IV 因子，影響抗凝檢測，要消除；同時 20% 的 V 因子來源于血小板，影響測定時間，要消除；最常見的狼瘡抗凝物會和血小板磷脂結(jié)合，導(dǎo)致假陰性，同時減少 APTT 時間，有實(shí)驗(yàn)顯示，非標(biāo)準(zhǔn)乏血小板血漿情況下，中度狼瘡抗凝物質(zhì)存在會減少 10 s APTT，要消除。

所以嚴(yán)格的離心力和離心時間就是為了得到上層乏血小板血漿，確保沒有自身磷脂的干擾，得到最最準(zhǔn)確的結(jié)果。